作者ROKEE (可不可以不要再胖下去啦~)
看板Biotech
标题Re: [问题]GST fusion protein效率不佳
时间Wed Mar 29 20:29:30 2006
※ 引述《zerpher (张开双手变成翅膀守护你)》之铭言:
: protein 的大小大概83kd左右
: vector是PGEX 6P-1
: 在DE3中表达
: 现在的问题是protein表达的效率太差
: 即使以KIT纯化也纯化不出足够的protein
: 有人有以GST系统表达较大分子量的经验吗?
: 此外同一个蛋白质也试过以lipofectamine transfection至BHK-21 cell
: 是以EGFP-N2做载体
: 也一样有效率太差的问题
: 是否有什麽解决的方法?
小弟也有个疑惑
pGEX系统不是tac promoter吗?
那为什麽还要送带有DE3的BL21呢?
可不可以用BL21或JM109然後IPTG诱导就好?
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最近尝试摸索中,恳请赐教:DDD
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