作者jedy (想去南極跟企鵝玩!)
看板Biotech
標題[問題] 關於western的電泳小問題
時間Tue Mar 21 18:44:38 2006
其實已經是大問題了
因為實驗需求 所以跑western
跑了三次 但是總是遇到一些瓶頸
不知道要怎麼解決 所以上來尋求一些意見
我所使用的是全新的bio-rad的電泳和濕式transfer設備
但是當我在跑電泳的時候
所花的時間很長 5-6小時
這跟我以前在做western跑電泳的情形差很多
本來以為是Tris buffer或是running buffer的問題
因為這些是自己泡的
結果這次全部重泡一次的
一開始有跑得比較順
但是跑到中間又開始跑不動了
而且這幾次我發現我的running buffer會從電泳槽會有些漏出來
（從外槽跟內槽連接的縫隙 不是外槽破掉 我check過了)
所以桌子會濕濕的
我在猜我的電泳會比較跑不動是不是跟那個running buffer漏出來有關呢
我跑的是brain tissue sample
利用的SDS-page 為10% resolving gel 5% stacking gel
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◆ From: 140.112.130.107
1F：推 blence:好奇的問，既然不是外槽破掉，桌子怎麼會濕濕的？ 03/21 20:48
2F：推 cleanbottle:buffer加太滿...但這應該不是跑不動的原因 03/21 21:52
3F：推 vixen:這應該不是western問題, 是SDSPAGE吧..buffer pH都對嗎? 03/22 04:00