作者jedy (想去南极跟企鹅玩!)
看板Biotech
标题[问题] 关於western的电泳小问题
时间Tue Mar 21 18:44:38 2006
其实已经是大问题了
因为实验需求 所以跑western
跑了三次 但是总是遇到一些瓶颈
不知道要怎麽解决 所以上来寻求一些意见
我所使用的是全新的bio-rad的电泳和湿式transfer设备
但是当我在跑电泳的时候
所花的时间很长 5-6小时
这跟我以前在做western跑电泳的情形差很多
本来以为是Tris buffer或是running buffer的问题
因为这些是自己泡的
结果这次全部重泡一次的
一开始有跑得比较顺
但是跑到中间又开始跑不动了
而且这几次我发现我的running buffer会从电泳槽会有些漏出来
（从外槽跟内槽连接的缝隙 不是外槽破掉 我check过了)
所以桌子会湿湿的
我在猜我的电泳会比较跑不动是不是跟那个running buffer漏出来有关呢
我跑的是brain tissue sample
利用的SDS-page 为10% resolving gel 5% stacking gel
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◆ From: 140.112.130.107
1F：推 blence:好奇的问，既然不是外槽破掉，桌子怎麽会湿湿的？ 03/21 20:48
2F：推 cleanbottle:buffer加太满...但这应该不是跑不动的原因 03/21 21:52
3F：推 vixen:这应该不是western问题, 是SDSPAGE吧..buffer pH都对吗? 03/22 04:00