※ 引述《datro (事在人為，非環境為)》之銘言： : ※ 引述《zamki (林小布)》之銘言： : : 聽說RNAi也頗燒錢的...... : : 麻煩有哪位才子才女跟我說明一下可以嗎........^^ : 之前才聽到國衛院的老師說過RNAi : 果真是燒錢的東西。 : 好像一個RNAi kit? 15000。 1. 如果只是訂購RNA neucleotide, 自己anneal再transfect進細胞, 非常燒錢, 以一個基因踹4段來說, 隨便就上萬. Dharmacon 賺你的錢也很狠, 這份文件RNAi Technical Reference & Application Guide 現在是免費的, 趕快去申請...厄, 我知道美國是免費, 我不知道台灣啦. http://www2.dharmacon.com/RNAiGuide?source=0 2. 這麼好賺的市場當然不可能全由Dharmacon獨享, 所以其他很多家 眼紅, 會推出不同方式的也要分食大餅, 比方Invitrogen採用 很長一段DNA-->RNA, Dicer in vitro process之後把片段全部transfect 進細胞, 通殺, 胡了!! 最好禱告這基因不會跟其他基因序列相似. 請進invitrogen.com搜尋BLOCK-iT Dicer RNAi Transfection kit 或stratagene的recombinant Dicer/GeneEraser 3. 以上兩種方法都是暫時的, 要stable的話, 另一種方法是在細胞內直接表現 short hairpin RNA片段, 有用retrovirus的, 也可以用lentivirus (如果你的細胞cell cycle不走的話, HIV是你的選擇), 比方BD/clontech 的pSiren系列與Invitrogen的Lentiviral RNAi system. 我個人的感覺是, 成功率與否除了跟目標序列有關外, 跟cell line種類也很有關係. 4. 請大家密切注意silencing library, 運氣好的話就不用自己做silencing了. 省很多力氣, 一般不那麼co的商用公司都會提供已經work的序列, 比方Qiagen http://www1.qiagen.com/Products/GeneSilencing/LibrarySiRna/ 5. 兩三年之前pSuper與pSHAG兩家實驗室對拼stable silencing的時期, 就已經 試過培養中的cell line抑制hepatitis病毒蛋白表現了, 流感這篇文章是 整隻老鼠應該比較有趣, 祝各位成功踏平一切基因. --

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