※ 引述《microkey (劍就是我的心)》之銘言： : ※ 引述《ptthamutaro (批踢踢的哈姆太郎￾ ￾NＩ》之銘言： : : 請問 無菌操作中 不論是養菌or細胞培養 : : 旁邊要有火源的目的? : : 是利用上升氣流來排除外物的污染嗎? : : 還是僅只用來燒燒瓶口上的雜菌? : : 另外所謂的"過火" 是只要將物品在火上"繞"一下即可? : : 還是要稍微"烤"過? : : 謝謝前輩們的解答!! : 我是東吳微生物系畢業的, 就我所學到的是 : 在酒精燈燃燒時火焰的周圍會有一個無菌的區域(細菌會被高溫殺死的區域) : 當落塵上面有細菌時就會被殺死, 所以為了避免被污染 : 一定要在無風的狀態下點酒精燈才會有效(包含旁邊不能有人走動, 不能在冷氣口下方) : 講排除是不太恰當的, 應該是講滅菌(對於會產生內孢子的菌可能就不太有用) : 過火的用意就是用高溫殺死器皿上面附著的菌(不論是空氣中落下還是由接觸附著的) : 所以應該要稍微的烤過不只是繞一下而已 : 做到最嚴格的時候甚至要把那個東西浸一下酒精拿去燒一下 : 要求在高一點就直接在Hood裡面操作(據說能夠阻擋99%的菌通過濾網) : 在下去可能都要穿無菌裝在無菌的實驗室裡面操作 : ps: 離酒精燈越近滅菌的效果當然越好, 但要小心別被燒到手就是了o.O 我記得旁邊有火源主要是造成上升氣流不讓一些灰塵或是細菌掉入瓶內或是培養基中 而在瓶口附近過一下火也是相同的原理，造成瓶內的空氣被加熱而產生上升氣流，如此 可減少污染物掉入瓶內。 關於過火是否可以殺死細菌此觀點，本人曾詢問過老師，其回答為：可以殺死細菌，不 過可能妳的瓶子有塑膠的部分會先融掉。過火或是無菌操作旁常有火源之主要原因為 造成上升氣流。過火是不可能殺死太多菌的。記得器具開口盡量不要與操作台成90度， 這樣或增加污染的機會。還有記的不要在上升氣流得下風處操作喔。 HEPA(High Efficiency Particulate Air)能阻擋大部分的細菌通過，我記得孔徑好像是 0.2um左右。 無菌操作台(laminarflow)的濾網(初級濾網、hepa(high-efficiency particulate air) 濾網)及氣流特性，可以避免在外面空氣中的灰塵或微生物落入細胞培養液中阻礙細胞的 正常生長。 一般的無菌操作台共有三個開關，一為風車開關，一為日光燈開關，另一個則為紫外燈 開關；為了學生操作的安全，我們已將紫外燈管拆卸下來。平時操作時請先將風車開關 打開，約五分鐘後，打開日光燈開關，開始操作實驗。 當在操作較大的血清瓶時，吸取時要將瓶子向著玻璃吸管的方向略呈傾斜，可以避免手 接觸瓶口造成污染。吸出溶液到另一容器時，此容器也是一樣要略呈傾斜。如果是要將 溶液注入多個瓶子時，可以將它們傾斜靠放在適當的容器架上。如果沒有適當容器架或 空間可以如此傾斜放置的話，要確定將各瓶子放在操作台後方，以免在操作過程中手在 瓶口晃過。 Reference http://ceiba3.cc.ntu.edu.tw/course/9a0b22/PowerPoint/Aseptic%20OPeration.doc --

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