※ 引述《microkey (剑就是我的心)》之铭言： : ※ 引述《ptthamutaro (批踢踢的哈姆太郎￾ ￾NＩ》之铭言： : : 请问 无菌操作中 不论是养菌or细胞培养 : : 旁边要有火源的目的? : : 是利用上升气流来排除外物的污染吗? : : 还是仅只用来烧烧瓶口上的杂菌? : : 另外所谓的"过火" 是只要将物品在火上"绕"一下即可? : : 还是要稍微"烤"过? : : 谢谢前辈们的解答!! : 我是东吴微生物系毕业的, 就我所学到的是 : 在酒精灯燃烧时火焰的周围会有一个无菌的区域(细菌会被高温杀死的区域) : 当落尘上面有细菌时就会被杀死, 所以为了避免被污染 : 一定要在无风的状态下点酒精灯才会有效(包含旁边不能有人走动, 不能在冷气口下方) : 讲排除是不太恰当的, 应该是讲灭菌(对於会产生内孢子的菌可能就不太有用) : 过火的用意就是用高温杀死器皿上面附着的菌(不论是空气中落下还是由接触附着的) : 所以应该要稍微的烤过不只是绕一下而已 : 做到最严格的时候甚至要把那个东西浸一下酒精拿去烧一下 : 要求在高一点就直接在Hood里面操作(据说能够阻挡99%的菌通过滤网) : 在下去可能都要穿无菌装在无菌的实验室里面操作 : ps: 离酒精灯越近灭菌的效果当然越好, 但要小心别被烧到手就是了o.O 我记得旁边有火源主要是造成上升气流不让一些灰尘或是细菌掉入瓶内或是培养基中 而在瓶口附近过一下火也是相同的原理，造成瓶内的空气被加热而产生上升气流，如此 可减少污染物掉入瓶内。 关於过火是否可以杀死细菌此观点，本人曾询问过老师，其回答为：可以杀死细菌，不 过可能你的瓶子有塑胶的部分会先融掉。过火或是无菌操作旁常有火源之主要原因为 造成上升气流。过火是不可能杀死太多菌的。记得器具开口尽量不要与操作台成90度， 这样或增加污染的机会。还有记的不要在上升气流得下风处操作喔。 HEPA(High Efficiency Particulate Air)能阻挡大部分的细菌通过，我记得孔径好像是 0.2um左右。 无菌操作台(laminarflow)的滤网(初级滤网、hepa(high-efficiency particulate air) 滤网)及气流特性，可以避免在外面空气中的灰尘或微生物落入细胞培养液中阻碍细胞的 正常生长。 一般的无菌操作台共有三个开关，一为风车开关，一为日光灯开关，另一个则为紫外灯 开关；为了学生操作的安全，我们已将紫外灯管拆卸下来。平时操作时请先将风车开关 打开，约五分钟後，打开日光灯开关，开始操作实验。 当在操作较大的血清瓶时，吸取时要将瓶子向着玻璃吸管的方向略呈倾斜，可以避免手 接触瓶口造成污染。吸出溶液到另一容器时，此容器也是一样要略呈倾斜。如果是要将 溶液注入多个瓶子时，可以将它们倾斜靠放在适当的容器架上。如果没有适当容器架或 空间可以如此倾斜放置的话，要确定将各瓶子放在操作台後方，以免在操作过程中手在 瓶口晃过。 Reference http://ceiba3.cc.ntu.edu.tw/course/9a0b22/PowerPoint/Aseptic%20OPeration.doc --

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