作者rambo2728 (Aquaporin)
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標題Re: [討論] 生化陶瓷環多久須更換?
時間Tue Mar 4 13:27:25 2008
以下為不負責任胡說八道XD，以前修分子生物課時，有講到如何把細胞從培養基
移除作subculture，其中有提到必備的一樣藥品就是trypsin+EDTA，TRYPSIN就是指
胰蛋白酉每←新注音打這個字後變問號= =，EDTA就是螯合劑。
細胞之間的貼附、連接靠的是Extracellular matrix，而ECM的成分主要為膠原
蛋白。L-Lysine、Arginine則是合成膠原蛋白的主要胺基酸。Trysin的主要功能是水
解小腸中的精胺酸(arginine）與離氨基酸(lysine)的C- terminal。
至於EDTA，是因為一般培養皿表面如玻璃、塑膠等大多帶了一層負電，所以細胞貼
壁常需要一些醣蛋白或二價陽離子(鈣、鎂離子)在細胞膜與培養基表面形成一連接層。
所以使用EDTA，可以利用其多對的lone pair與二價陽離子形成配位共價鍵，加速細
胞脫落。
↑這邊是當時我打的作業的一部份再做整理...不過參考哪也忘了= =
至於生物珠時常會因為細胞的新陳代謝與死亡後所阻塞，我想之所以沸水等作用
有限，應該就是因為細胞的屍體等本來就與濾材已結構緊密。所以這裡才需用到TRYPSIN
和EDTA這兩種藥物，再配合超音波洗淨機，也許是有辦法將原本阻塞的濾材再給打通..
不過最大的問題...trypsin好貴呀= =...
另外，因為我學的都是關於真核細胞的技術，我這邊只是將真核細胞的技術套用到
原核細胞上，是不是也可以適用...我這就不知道了囉XD
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◆ From: 203.68.59.223
※ 編輯: rambo2728 來自: 203.68.59.223 (03/04 13:28)
1F：推 Hawks801:所以用燒的把細胞氣化這方法最好了...XD 03/04 13:50
2F：推 FlyinDeath:雙氧水行不行 <= 完全是亂入 XDD 03/04 14:34
3F：推 herbawilliam:報告！燒的測試過了，結果是炭積到濾材上，看來完全 03/04 14:48
4F：→ herbawilliam:氧化燒結才行，下次來試試公司的燒結爐.... 03/04 14:49
5F：推 DROT:用強酸或強鹼洗呢? 03/04 15:29
6F：推 DROT:用強酸可能太誇張~如果用醋呢? 03/04 15:34
7F：推 EliteStanley: 感 03/04 19:49
8F：推 EliteStanley: 謝 03/04 19:49
9F：推 EliteStanley: 您 03/04 19:49
10F：推 EliteStanley: 的 03/04 19:49
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12F：推 EliteStanley: 心 03/04 19:49
13F：推 EliteStanley: 分 03/04 19:49
14F：推 EliteStanley: 享 03/04 19:49
15F：推 EliteStanley: 喔 03/04 19:49
16F：推 EliteStanley: ! 03/04 19:49
17F：推 FlyinDeath:燒結...直接買新的會不會比較便宜 XDD 03/04 20:48
18F：推 r010500:Trypsin-EDTA0.25%未滅菌只要400多 但拿來這種用途怪怪的 03/04 20:52
19F：→ r010500:五樓講的酸水解和鹼水解也許可行 但得用煮的 最後只剩下粗 03/04 20:55
20F：→ r010500:纖維 我記得是用硫酸和氫氧化鈉 濃度我忘了 想知得查查 03/04 20:58
21F：→ rambo2728:不清楚陶瓷環的成分囉 雖然說是陶瓷 但加強酸會冒泡嗎XD 03/04 21:21
22F：→ rambo2728:怕就怕會有碳酸鈣之類的成分添加@@||| 03/04 21:22
23F：→ DROT:對~如果有添加石灰質...放到酸後再放到濾盒~到時就.... 03/04 21:55
24F：推 choas5343 :爬文看到想講一下.... 05/29 03:33
25F：→ choas5343 :所謂的Trypsin是指切斷細胞與細胞間的Junction(連結 05/29 03:34
26F：→ choas5343 :或是與細胞外基質的連接 05/29 03:34
27F：→ choas5343 :此細胞連結靠的是Ca離子等等離子，故含有EDTA 05/29 03:35
28F：→ choas5343 :而Trypsin是切斷在Extracellular Matrix (ECM) 05/29 03:38
29F：→ choas5343 :的fibronectin與細胞的integrin直接的建結 05/29 03:42
30F：→ choas5343 :或是其他的建結 05/29 03:43
31F：→ choas5343 :此種方式的切斷是用於實驗室中培養細胞時繼代的方法 05/29 03:43
32F：→ choas5343 :但是在"細菌",或是"藻類"此種方法並不適用 05/29 03:44