作者rambo2728 (Aquaporin)
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标题Re: [讨论] 生化陶瓷环多久须更换?
时间Tue Mar 4 13:27:25 2008
以下为不负责任胡说八道XD，以前修分子生物课时，有讲到如何把细胞从培养基
移除作subculture，其中有提到必备的一样药品就是trypsin+EDTA，TRYPSIN就是指
胰蛋白酉每←新注音打这个字後变问号= =，EDTA就是螯合剂。
细胞之间的贴附、连接靠的是Extracellular matrix，而ECM的成分主要为胶原
蛋白。L-Lysine、Arginine则是合成胶原蛋白的主要胺基酸。Trysin的主要功能是水
解小肠中的精胺酸(arginine）与离氨基酸(lysine)的C- terminal。
至於EDTA，是因为一般培养皿表面如玻璃、塑胶等大多带了一层负电，所以细胞贴
壁常需要一些醣蛋白或二价阳离子(钙、镁离子)在细胞膜与培养基表面形成一连接层。
所以使用EDTA，可以利用其多对的lone pair与二价阳离子形成配位共价键，加速细
胞脱落。
↑这边是当时我打的作业的一部份再做整理...不过参考哪也忘了= =
至於生物珠时常会因为细胞的新陈代谢与死亡後所阻塞，我想之所以沸水等作用
有限，应该就是因为细胞的屍体等本来就与滤材已结构紧密。所以这里才需用到TRYPSIN
和EDTA这两种药物，再配合超音波洗净机，也许是有办法将原本阻塞的滤材再给打通..
不过最大的问题...trypsin好贵呀= =...
另外，因为我学的都是关於真核细胞的技术，我这边只是将真核细胞的技术套用到
原核细胞上，是不是也可以适用...我这就不知道了罗XD
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◆ From: 203.68.59.223
※ 编辑: rambo2728 来自: 203.68.59.223 (03/04 13:28)
1F：推 Hawks801:所以用烧的把细胞气化这方法最好了...XD 03/04 13:50
2F：推 FlyinDeath:双氧水行不行 <= 完全是乱入 XDD 03/04 14:34
3F：推 herbawilliam:报告！烧的测试过了，结果是炭积到滤材上，看来完全 03/04 14:48
4F：→ herbawilliam:氧化烧结才行，下次来试试公司的烧结炉.... 03/04 14:49
5F：推 DROT:用强酸或强硷洗呢? 03/04 15:29
6F：推 DROT:用强酸可能太夸张~如果用醋呢? 03/04 15:34
7F：推 EliteStanley: 感 03/04 19:49
8F：推 EliteStanley: 谢 03/04 19:49
9F：推 EliteStanley: 您 03/04 19:49
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15F：推 EliteStanley: 喔 03/04 19:49
16F：推 EliteStanley: ! 03/04 19:49
17F：推 FlyinDeath:烧结...直接买新的会不会比较便宜 XDD 03/04 20:48
18F：推 r010500:Trypsin-EDTA0.25%未灭菌只要400多 但拿来这种用途怪怪的 03/04 20:52
19F：→ r010500:五楼讲的酸水解和硷水解也许可行 但得用煮的 最後只剩下粗 03/04 20:55
20F：→ r010500:纤维 我记得是用硫酸和氢氧化钠 浓度我忘了 想知得查查 03/04 20:58
21F：→ rambo2728:不清楚陶瓷环的成分罗 虽然说是陶瓷 但加强酸会冒泡吗XD 03/04 21:21
22F：→ rambo2728:怕就怕会有碳酸钙之类的成分添加@@||| 03/04 21:22
23F：→ DROT:对~如果有添加石灰质...放到酸後再放到滤盒~到时就.... 03/04 21:55
24F：推 choas5343 :爬文看到想讲一下.... 05/29 03:33
25F：→ choas5343 :所谓的Trypsin是指切断细胞与细胞间的Junction(连结 05/29 03:34
26F：→ choas5343 :或是与细胞外基质的连接 05/29 03:34
27F：→ choas5343 :此细胞连结靠的是Ca离子等等离子，故含有EDTA 05/29 03:35
28F：→ choas5343 :而Trypsin是切断在Extracellular Matrix (ECM) 05/29 03:38
29F：→ choas5343 :的fibronectin与细胞的integrin直接的建结 05/29 03:42
30F：→ choas5343 :或是其他的建结 05/29 03:43
31F：→ choas5343 :此种方式的切断是用於实验室中培养细胞时继代的方法 05/29 03:43
32F：→ choas5343 :但是在"细菌",或是"藻类"此种方法并不适用 05/29 03:44