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先說這一篇會很長 如果不想要看的請先跳出去 這一篇是我從大陸某個網站偷來的 忘了是哪一個網站了 裡面是寫了一些豐年蝦相關的科普資訊 我覺得不錯啦 可以看看 若有啥問題歡迎討論提問 小弟我對於豐年蝦還算熟啦 ^^"" 之前作了些不同廠牌豐年蝦的孵化率試驗 以及看了些滋養豐年蝦相關的論文 所以有興趣的也可以歡迎大家一起討論唷 ^^ ------------------------------------------------------------------------------ 鹵蟲的孵化、營養加強和應用 徐娟兒 福建省水產技術推廣總站 一、 鹵蟲的分類地位、形態特徵和分佈 1.分類地位:鹵蟲(Artemia spp.)有稱鹽水豐年蟲、豐年蝦、鹵蟲子、鹵蝦等,是一種 世界性分佈的小型甲殼類。在分類學隸屬於節肢動物門(Phylum Arthropoda),甲殼 綱(Class Crustacea),鰓足亞綱(Subclass Branchiopoda),無甲目(Order Anos taca),鹵蟲科(Family Artemiidae),鹵蟲屬(Genus Artemia。) 2.形態特徵:鹵蟲的顏色與生活環境有關,一般在高鹽水域呈紅色,而在鹽度較低的水中 呈白色。蟲體較細長,全長1.2—1.5cm。明顯地分為頭、胸、腹部,不具頭胸甲。頭部 5節,5對頭肢,分別是第一、第二觸角、大顎、第一和第二小顎。胸部11節,有11對胸 肢。腹部由8節組成,不具附肢。鹵蟲發育有變態階段。冬卵孵出的無節幼蟲很小,體 長0.3-0.4mm,體寬0.25-0.30mm(包括附肢的基部),身體呈長橢圓形,不分節,具3 對附肢,呈淡肉紅色。孵化3天后,幼蟲生長到0.8-0.9mm,附肢加長,活動力加強,消 化道明顯可見,複眼開始出現,體後部分隱約可見,此時進入後無節幼蟲期。 3.分佈:全世界已有300多個以上的鹽湖或鹽田發現鹵蟲,風及水鳥是傳播鹵蟲的主要媒 介。目前在南美州及澳州的鹵蟲則是人們為了改進鹽的品質或是為了發展水產養殖而移 殖的。在自然界鹵蟲一般出現在下列地區:能保持穩定高鹽度(波美10-18度為宜), 因為在這種水域中才能排除鹵蟲的捕食者;或是在冬季有冰凍期,因為在冰凍的低溫環 境,即使鹵蟲有機會吸水也無法進行新陳代謝不會孵化,可以存活到第二年春天;在有 明顯的旱季及雨季的地區,例如東南亞的菲律賓、泰國、我國的東南部,雖然在旱季鹽 田能保持一定的鹽度,鹵蟲有充分生長的機會,但雨季時鹽度驟然下降,捕食鹵蟲的動 物孳生而造成雨季過後鹵蟲消失。 我國鹵蟲分佈極廣,一般可分為沿海鹽田和內陸鹽湖區。我國沿海12個省、市、自治區 ,除了廣東和上海未見調查資料外,其他地區均有鹵蟲分佈,已發現鹵蟲分佈點30多處 ,主要分佈于長江以北,而集中產區在遼東灣、渤海灣和萊州周圍,鹵蟲和鹵蟲卵產量 約占全國沿海產量的90%以上。中國內陸鹽湖區已發現有鹵蟲分佈的地區是內蒙、河北 、寧夏、甘肅、青海、新疆、山西、雲南和西藏等9個省、自治區,共有鹵蟲分佈點44 處,河北省是唯一既有沿海鹵蟲分佈又有鹽湖鹵蟲分佈的省份。有大量鹵蟲的地區為 華北鹽田、海南島西岸鹽田、山西運城鹽湖、新疆艾比湖。鹵蟲在世界上其他地方分 佈也很廣泛,非州、大洋州、北美州、中美州及加勒比海、南美州、中亞及遠東以及 歐州均有分佈,其中以北美州、歐州的西班牙和前蘇聯等地分佈點較多。 總的來說,鹵蟲的主要產地為我國北方海鹽區的鹽田,美國加州沿岸的鹽田,猶他州 的大鹽湖,加拿大、法國、西班牙及巴西東岸的鹽田,其中除了巴西是1977年人為的 播種移植後傳播開來的以外,其他均為本地原有的。目前主要的鹵蟲卵品牌有來自中國 、美國、加拿大、巴西、阿根廷、墨西哥、秘魯、印度、伊朗、以色列、澳大利亞、 法國、義大利、獨聯體等20多個國家的不同地理品系。不同產地、不同品系的鹵蟲卵 品質不同,但以法國的拉瓦爾、巴西馬考、義大利的馬格裏培、美國加利福尼亞州三 藩市灣、澳大利亞的沙克灣和中國天津等地出產的鹵蟲卵品質較優。 二、鹵蟲的生物學特性 不同產地的鹵蟲各自有對其生長環境的適應,但一般而言有以下特性: 1.溫度:鹵蟲是廣溫性的動物,在6-35℃範圍均可存活,但因產地的不同有所差異,有的 品系低於3℃時存活率為零,最適生長溫度為25-30℃。而鹵蟲卵對溫度的耐受力則要廣 些,水分含量為2-5%的乾燥鹵蟲卵對外界環境因數有驚人的耐受力,例如將乾燥鹵蟲卵 放置於-273—60℃並不會影響其孵化率。短時間內放置於60-90℃也不會影響孵化率, 但在此溫度範圍內,隨著溫度的增高而耐受的時間減短。 2.水中的離子濃度:鹵蟲棲息的環境是多種多樣的,按緯度來分生活與生活熱帶、亞熱帶 或溫帶;按離子種類來分有氯化鈉型(如海鹽區的鹽田)、硫酸鹽型(如新疆的艾比湖 、加拿大的卓別林湖)、碳酸鹽型(如美國加州的摩洛湖)及鉀鹽型(美國的尼布拉斯 加鹽湖),鹵蟲不但能耐受比海水中主要離子濃度更高的濃度,同時也能耐受最低的濃 度。 3.溶解氧、pH值:鹵蟲適應溶解氧的能力極強,如在1ppm這樣極低溶氧狀態下可生存,也 可生活於溶氧為飽和溶氧量的150%的環境中。鹵蟲天然生長的環境為中性到鹼性,而孵 化用水的pH值以8—9為宜,當pH值降到8以下時會降低孵化率。 4.鹽度:鹵蟲耐鹽範圍很廣一般為3—330?,但並不是所有的鹵蟲品系耐鹽都在此範圍內 ,有些品系在5?的鹽度下,死亡率很高,如美國大鹽湖鹵蟲以及中國青島鹵蟲就不能在 3?的鹽度下生存,而且鹵蟲生長的不同階段耐鹽性也不同,鹵蟲的幼蟲對低鹽度適應能 力較強,在實驗室培養下,Be′2的存活率高於90%,低鹽度時比高鹽度的存活率高,但 成熟之後存活率下降。由於鹵蟲沒有任何攻擊及自衛能力,因此很容易被魚、甲殼類、 昆蟲、水鳥等肉食性動物捕食,所以在天然海水中是不會看到鹵蟲的。在我國北方的鹽 場在Be′6、7度以上才可見到鹵蟲。但鹽度接近飽和鹽水時(高於Be′25),由於高鹽 度對鹵蟲生理上的壓力及毒性,鹵蟲無法忍耐而死亡。 5.攝食特性:鹵蟲是一種典型的濾食生物,對食物沒有選擇性,可攝食數微米至50μm的 顆粒狀物質,攝入率較高的為顆粒大小5—16μm的物質,攝食的方式為不停地擺動胸足 使部分水流流入口腔,同時攝取水流中的顆粒。天然鹵蟲攝取的食物有細菌、微藻及有 機碎屑等,鹵蟲的大量出現通常與微藻的大量生長相配合的,所以在實驗室條件下,用 微藻如杜氏藻培養鹵蟲即可獲得良好的生長結果。 6.繁殖特性:鹵蟲有兩類,一類為孤雌生殖鹵蟲,一類是兩性生殖鹵蟲。一般認為,孤雌 生殖鹵蟲和兩性生殖鹵蟲即使生活在同一地區,也存在生殖隔離現象,它們之間是種間 的差別。至今已描述的鹵蟲品系已超過150種,已確定的兩性生殖鹵蟲有6種,國內的鹵 蟲品系多是行孤雌生殖的,有報導山西運城鹽湖等地的鹵蟲行兩性生殖。 鹵蟲的繁殖期北方一般為4月份—11月份。有卵生和卵胎生兩種生殖方式,卵生是指子代 以卵的方式自母體內產出,卵胎生指子代自母體內產出時是已孵化為小的無節幼蟲。雌 性鹵蟲的生殖系統能形成兩種類型的卵—冬卵和夏卵。關於控制產冬卵和夏卵的機制還 不清楚,但一般認為環境條件好時產夏卵,條件較差時產冬卵。夏卵在育卵囊內發育至 無節幼蟲時才產出,此為卵胎生,這種生殖方式能迅速地增加鹵蟲的數量。冬卵(又稱 休眠卵、耐久卵)的外麵包有一層厚厚的卵殼,是卵殼腺分泌形成的,這種卵在雌體的 育卵囊內發育至約4000個細胞即停止發育並進入滯育期,產其後不經一定條件的刺激不 能孵化,這就是通常在水產養殖中所使用的鹵蟲卵。耐久卵在一定條件下,中止滯育, 啟動孵化生理,重新開始胚胎發育,最後孵化為無節幼蟲。 三、鹵蟲的營養價值、營養強化及其在水產養殖中的應用 1.鹵蟲的營養價值:鹵蟲是水產動物育苗生產中的重要生物餌料,但不同品系的鹵蟲作為 餌料的效果並非相同,因為不同品系的鹵蟲營養成分有很大的差異,但與餵養效果最有 關的是必需脂肪酸(EFA)尤其是高度不飽和脂肪酸(HUFA)的含量及組成,特別是 18:3ω3、18:4ω3、20:5ω3這三種含量。研究表明18:3ω3、18:4ω3是淡水種類 所必須的脂肪酸,因此在淡水養殖中要選擇18:3ω3、18:4ω3含量高的品系如美國聖 保羅灣、美國猶他和美國三藩市某些批號的鹵蟲;20:5ω3是海產動物所必須的脂肪酸 ,因此在海水魚蝦育苗中要盡可能選擇20:5ω3含量高的品系ꄊ 2.鹵蟲的營養強化:實際上就是對鹵蟲無節幼體進行營養強化,鹵蟲幼體所含的營養成分 對魚類的生長速度、抗病力及成活率等均有重要的影響。在各種營養成分中,以n—3系 列中不飽和脂肪酸,特別是20:5ω3(EPA)和22:6ω3(DHA)的含量對餌料效果影響 明顯,因此可對鹵蟲無節幼蟲用富含EPA和DHA的物質進行強化。由於鹵蟲的初孵無節幼 蟲攝食能力差,一般不用微藻強化。目前使用的是直接用強化劑強化,這類強化劑含有 多種不飽和脂肪酸和維生素,是經乳化製成的乳濁液,使用時比較容易與水混合,一般 是從魚油、烏賊油等海洋動物中提取的。強化劑的品牌很多,不同的型號的強化劑所含 的成分不完全相同,使用時應根據其使用說明操作。 3.在水產養殖中的應用:鹵蟲的無節幼體已廣泛用於育苗,而人們對無節幼體以外的各期 幼體及成體的利用也逐漸的增多,這是因為鹵蟲成體有相當高的營養價值,含有60%蛋 白質和豐富的各種必須氨基酸和多聚不飽和脂肪酸,此外還含有較多的維生素、激素及 胡蘿蔔素,而且成體的外殼很薄(小於1μ),不必預先加工即可直接投喂許多水產養 殖動物的幼體和成體,效果比配合飼料好,巴西和泰國分別用鮮活投喂對蝦的後期幼體 和遮目魚的稚魚均得到良好的餌料效果,我國北方天然鹵蟲比較豐富的地區(如河北、 山東等鹽田較多的沿海地區)已大量用於海水動物人工育苗,鮮活鹵蟲作為家禽的飼料 也有多年的歷史了,美國的加州及巴西的鹽田均有大量的鮮活鹵蟲出售,而在泰國、菲 律賓和西澳大利亞則有人工養殖鹵蟲出售成體。鹵蟲成體也可作為觀賞魚的餌料;鮮活 鹵蟲還可以用在將魚蝦苗從育苗室(人為控制的環境)過渡到室外養成池的餌料;也可 用于天然魚蝦苗經運輸後比較衰弱時的餌料。另外,由於鹵蟲含有較多的脫皮激素,已 有實驗表明用鹵蟲成體餵養對蝦可促進親蝦的成熟。除了可直接做水產養殖物件的餌料 ,鹵蟲在非州、美州的一些土著食用曬乾的鹵蟲,泰國將鹵蟲製成蝦醬供人們食用,在 美國、新西蘭等國的市場出售一種“鹵蟲薄餅”的加工品,味道類似幹蝦,較可口,做 保健食品,銷路看好。同時由於鹵蟲蛋白質含量豐富,是魚類和甲殼類的良好餌料,且 容易飼養,天然資源量大,可取代部分魚粉作為水產養殖業最重要的蛋白源。 四、鹵蟲的研究概況 鹵蟲的研究自1775年開始,至今已有200多年的歷史,自從20世紀30年代美國的Seale (1933)和挪威的Rollefsen(1939)等發現鹵蟲的無節幼體是魚類的最佳餌料後,鹵蟲 就逐漸成為海水養殖中最重要的餌料。20世紀60年代,隨著水產養殖的興起,鹵蟲越來 越多地被利用於養殖業,鹵蟲價格逐日上升,20世紀70年代末、80年代初巴西、泰國、菲 律賓、印度等國開展了鹵蟲大面積人工移殖、增養殖等試驗,比利時、美國等則進行鹵 蟲室內高密度精養技術的研究。聯合國開發合作署和比利時等國的開發合作組織,對國 際上的鹵蟲養殖和研究活動經費提供資助,並且於1978年在比例時的肯特大學設立了涵 蓋各學科的“國際鹵蟲研究中心“,協調各國的鹵蟲研究,同時還不定期的舉辦鹵蟲研究 培訓班、不定期出版鹵蟲科技簡訊(報導與鹵蟲研究、鹵蟲應用有關的最新資訊)。迄 今為止,在鹵蟲的形態、品系特徵、生態學、遺產、放射生物學、毒理學、生理、生化 、分子生物學、代謝與發育學、與核酸及核?酸代謝有關的?、基因的結構、養殖及鹵蟲ꘊ 在殖上應用等方面均有所研究,並取得一定的進展。 國從1958年即開始把鹵蟲的無節幼體應用於海產稚魚的餌料,同時也開展了對鹵蟲卵的 採集、孵化和培養的研究。1975年陳清潮等開展了對我國鹵蟲卵資源全面調查,並提出了 低溫冷凍處理鹵蟲冬卵,將鹵蟲卵的孵化率提高約20%;20世紀80年代開展了較多的對鹵蟲 研究,其中有去殼卵的試驗和餌料效果的營養分析等,80年代中、後期青島海洋大學(今 中國海洋大學)的水產系、生物系做了許多鹵蟲基礎方面的工作,其中包括生物學的測定 、孵化率、實驗生態學、生殖、分類、藥物載體和電泳等方面研究。養殖方面在我國主要 是進行室內小型培養鹵蟲,中試水準的不多1982年青島海大水產系李德尚首先進行了室外 鹵蟲養殖,平均91.5公斤,1987-1988年該校生物進行了鹵蟲養殖技術研究,畝產為231.5 —255公斤,1988-1989年該校水產系孫世春等也進行了此項研究,畝產491.6公斤。近年 來我國在鹵蟲卵加工工藝、提高孵化率方面多了較多工作。 五、鹵蟲卵的品質評價 鹵蟲卵的品質可以從兩個方面來評價,對養殖者而言,理想的餌料生物是來源可靠,而且 使用時操作方便,鹵蟲卵完全能適合於這個特點。因為鹵蟲的無節幼體可以從蟲卵孵化而 得到,而且鹵蟲卵也已商品化可以買到。又由於鹵蟲無節幼體對各種環境有很廣泛的耐受 力,即使操作過程非常粗心也不致于完全失敗。同時鹵蟲可以做為或載體而解決一些不易 投喂物質的投喂方法。唯一不足的是不同的鹵蟲品系間存在著多方面的差異。對養殖者而 言,必須具有較好的物理特性及營養價值。在物理特性方面,只要在孵化前經過消毒或去 殼處理,基本上可以滿足養殖物件幼體的攝食,最常發生的問題是鹵蟲無節幼體的大小, 尤其是那些體長大於428μm的幼體比較不易被某些海產魚蝦的幼體所攝食。鹵蟲卵的品質 必須從多方面評價,但主要的評價項目有孵化品質、蟲卵及無節幼體的生物學測定值、脂 肪酸組成及含量分析、實際的餌料效果或餵養試驗等。 1.鹵蟲卵的孵化品質:不同的鹵蟲品系其孵化品質有很大的不同,收 獲的方法和蟲卵加工、貯藏時間和條件以及不同孵化環境也影響孵化品質。在得到某一 品系的鹵蟲卵時,首先檢查鹵蟲卵是否處於密封、真空、避光的狀態,如果不是真空裝 罐或是充氮氣,在室溫有氧環境下,存放數月後孵化率即會下降,在極低溫下(如—20℃ )冷凍,可增加耐久卵的成活期,但如果低溫保存,使用前必須提前1—2個月放在室溫 ,否則會降低孵化率。鹵蟲卵從肉眼觀察顆粒大小要均勻、顏色一致、無雜質(摻有沙 、鹽、泥、裂的卵殼、空殼及其它有機物會使孵化時水中細菌大量繁殖造成水質惡化, 直接或間接影響孵化品質)。對於濕卵(以水份為物件)摸時一般以手摸能散開,無冰 晶、水份約在4%左右為好;而對於幹卵一般以乾燥度高、分散度佳為好。從嗅覺方面來갊 聞一聞,一般以無臭味的品質較好。進一步用解剖鏡觀察大小、雜質、空殼多少,同時 還要看是否有凹陷(有凹陷為好)。除了這些外在觀察外,衡量鹵蟲卵孵化品質的最主 要標準有以下四個指標。 (1)孵化率(孵化百分率或百分比):指每百粒蟲卵所能孵化出的無節幼體個數。優質 蟲卵的孵化率90%以上。孵化率不能表示出雜質及空殼含量等。 (2)孵化效率:每克鹵蟲蟲卵所能孵化出的無節幼體個數。最高孵化效率為30萬無節幼 體/克蟲卵。這個數值可表示出鹵蟲卵的孵出情況和雜質含量,但是不能表示出無節 幼體的大小和重量。 (3)孵化量:每克蟲卵能孵化出的無節幼體的總幹重(毫克)。最高孵化量為600毫克幹 重/克幹蟲卵。孵化量最能表示出蟲卵的品質,是最可靠的一種鹵蟲卵品質評價方法。 (4)孵化速度:這個數值可以表示鹵蟲卵孵化快慢及同步性。在水溫25℃的天然海水中똊 i行孵化時得到的最佳孵化速度是15小時開始出現無節幼體,而後的5個小時內有90% 的鹵蟲卵孵出。根據孵化速度可以計算出何時收集孵出的無節幼體,以便得到含有 高能量的無節幼體。 2.鹵蟲卵的生物學測定: 不同品系的鹵蟲卵及其所孵出的無節幼體的大小不同,卵殼的厚度亦不相同。卵殼薄孵 化較快,且有用成分的相對含量較高。另外,無節幼體的大小對於不同育苗物件的攝食븊 應性也不同,無節幼體的大小直接決定了是否能被魚蝦幼體攝食,是決定餌料效果的因 數之一。大部分的經濟水產動物的幼體在開口之初先攝食微藻(50μm),然後攝取100 —200μm大小的浮游動物,如輪蟲之後以大於200μm的浮游動物(如鹵蟲的無節幼體等ꄊ 為餌料。由於不同產地的鹵蟲卵其孵化出的無節幼體大小不一,因此可根據魚蝦不同或 隨魚蝦發育階段不同選擇合適的鹵蟲無節幼體來投喂。孵出的鹵蟲無節幼體體長小的只 有410μm左右,大的可達520μm左右,有人認為只要鹵蟲無節幼體的大小不大到妨礙捕 食者的攝食,一般是越大越好,因為可以省去捕食者的能量,但也有人認為無節幼體小 單位體積所含的無節幼體數目多,那麼幼苗攝取鹵蟲無節幼體的機會也多。總之,可以 按照需求不同來選擇不同品系的鹵蟲卵。 3.鹵蟲無節幼體的脂肪酸含量及組成成分分析不同脂肪酸(特別是ω3系列高度不飽和脂 肪酸)的含量和組成對養殖動物的餌料效果有重大影響,因為養殖動物的某些必須不 飽和脂肪酸只有從食物才能獲得。脂肪酸含量和組成可用氣相色譜或高壓液相色譜來測 定分析。若不可能做到這一點,那麼在使用鹵蟲無節幼體之前,不管何種品系鹵蟲,有 必要進行給餌前的高度不飽和脂肪酸的強化,因為同一品系的鹵蟲其無節幼體的脂肪酸 含量也並非一成不變,同一品系鹵蟲可能由於採收季節的不同,其高度不飽和脂肪酸含 量可能有很大的不同,這可能是鹵蟲攝食不同營養成分的餌料而引起的。 4.從餵養效果來測定餌料效果 即通過養殖動物的增重及生長發育等情況來判斷鹵蟲卵的優劣。當要分析某一品系鹵蟲 在營養成分上是否有缺陷、或是含有污染物時,最好先進行餵養試驗,肯定了餵養效果 之後再大量地用於育苗。餵養試驗可以在育苗物件上進行也可採用其他易操作的動物, 不論用什麼動物進行試驗均要先把試驗條件標準化。試驗條件包括:水質、水溫、鹽度 、充氣量、光照(包括光照強度及光週期)、供試驗動物放養密度、鹵蟲無節幼體的密 度、投喂的次數、試驗期的長短、重複次數等,每次試驗均要同時進行一組正對照(用 鹵蟲參考中心的標準卵或是某一品質較穩定的品系的鹵蟲卵對照組不投喂任何餌料做為 負對照組。 六、鹵蟲卵發育、孵化與無節幼體分離技術 1.鹵蟲卵發育:鹵蟲卵在鹽度較低時即能充分吸水成為圓球形,此時卵內的胚胎開始有 生理代謝活動,吸水24小時後,卵的外殼裂開,露出胚胎(實為被一層孵化膜所包圍) ,數小時後,胚胎完全脫離了外殼但仍然吊在外殼下,此期為稱為傘期,但胚胎發育成 為無節幼體時,無節幼體的附肢開始運動,使孵化膜破裂而遊出。剛孵化的無節幼體稱 為Ⅰ齡期幼體,體長為400-500μm,因為這時體內還有卵黃,因此用肉眼看為淺桔色, 有三對附肢,分別為有感覺功能的第一觸角、有運動及濾食功能的第二觸角和有攝食功 能的一對大顎。此期的幼體在頭部有一個單眼,胸部有葉口及肛門均為關閉的,因此無 法攝食。12小時後Ⅰ齡期幼體脫皮發育成Ⅱ齡期幼體,從這時起開始攝食,由第二觸角 的運動可射入大小為40μm以下的顆粒,如細菌、微藻和有機碎屑等。從孵化到成體約 需脫皮15次,隨著脫皮各器官進行分化,例如在胸部長出成對的胸肢,頭部長出一對複 眼等。在X齡期幼體之後形態上有明顯的變化,第二觸角失去運動功能而分化成性器官。 雄性的第二觸角發育成斧狀抱器,而雌體的第二觸角則退化成感覺器官。 2.鹵蟲卵孵化:一般認為將蟲卵放入海水中即可孵化,但要大量孵化鹵蟲卵得到高密度的 無節幼體則受孵化條件和孵化方法影響。 (1)孵化條件:鹵蟲卵的孵化一般在孵化桶、罐、槽中充氣進行。孵化率是衡量蟲卵的 孵化效果和蟲卵品質的尺度。孵化率是指孵化卵數占蟲卵總數的百分數。除蟲卵品 質外,影響孵化率的因數有下列幾個: 溫度:當水的溫度在-18—4℃或32—40℃時,鹵蟲卵的胚胎不會死亡,但不會孵化 ;當水溫在4—32℃之間時,隨著溫度的升高,胚胎的代謝加強。在生產上的孵化溫 度一般維持在25—30℃為宜,以28℃為最好。溫度25℃以下孵化時間延長,溫度 33℃以上時,過高的溫度會使胚胎發育停止。孵化過程最好保持恒溫,以保證孵化ꘊ 同步進行,同時也有利於無節幼體的收集。 鹽度:鹵蟲卵在天然海水甚至在鹽度為100?的鹵水中都能孵化,但一般在較淡的海 水中孵化率較高。常用正常海水、人工海水或用粗鹽配製的鹽度為20—30?的孵化水 為好,如埕口鹽場、鶯歌海鹽場和柯柯鹽場的鹵蟲卵最適鹽度分別為30?、20?和35? ,但有些品牌的鹵蟲卵推薦使用的鹽度為15?。 pH:一般以8—9之間為佳。由於在孵化過程中產生大量的CO2,因此,在生產上大量 、高密度孵化時一定要加NaHCO3用來中和產生的CO2,以保證pH值不低於8.0。每升孵 化水加1-2克的NaHCO3可穩定孵化用水的pH。 溶解氧和充氣:在孵化缸的底部放置足夠的充氣石,孵化過程中需連續充氣,使水 體翻滾,避免在缸底形成死角,從而防止卵堆積、缺氧死亡。生產上一般溶解氧維 持在2毫克/升的水準可得到最佳的孵化效果。因而對充氣量應作適當的控制,不宜 過大,使蟲卵能均勻分佈而又能避免機械損傷。 光照:適宜的光照對鹵蟲孵化初期的胚胎發育有促進作用,提高蟲卵孵化率,所以 蟲卵浸泡淡水充分吸水1小時內光照是至關重要的。一般用2000lux的光照即能取得 最佳效果。孵化時常採用人工光照,用日光燈或白熾等從孵化缸的上方照明。 鹵蟲卵密度:鹵蟲卵的密度以蟲卵的品質來定,優質蟲卵(孵化率85%以上)適宜密 度為5克幹重/升,一般採用1-3克幹重/升。否則密度過大時為了維持足夠的溶解氧, 要加大充氣量,而充氣量過大時,不但會產生較多的泡沫使蟲卵黏附對孵化不利, 而且也可能會使無節幼體受傷。 鹵蟲卵的消毒:由於鹵蟲卵外殼上常常帶有大量的細菌、黴菌孢子及有機碎屑,當 水溫較高而且是大量孵化時,常引起細菌等大量繁殖,使水中的溶解氧降低以及孵 化用水變得混濁而降低孵化率,同時用帶有大量細菌情況下孵出的無節幼體投喂也 易使魚蝦發病,因此,如果鹵蟲卵是未經消毒加工處理的粗品時,一定要經過消毒 處理後使用,處理方法有:漂白粉或漂白精、去殼、雙氧水以及甲醛溶液等處理。 (2)孵化方法:孵化用缸最好是具錐形底的玻璃鋼桶或是透明的塑膠袋。用前要對孵 化缸進行消毒處理,孵化前鹵蟲卵常用淡水浸泡1至數小時,使蟲卵充分吸水,以 加快孵化速度,減少孵化過程中能量消耗。為了殺滅蟲卵表面黏附細菌,孵化前 要對蟲卵進行消毒,一般用2%—3%的福馬林浸泡10—15分鐘,或用每立方米水體ꐊ 之中200克的有效氯浸泡20分鐘。在上述孵化條件下,鹵蟲卵經過24—36小時即可 孵化出無節幼體。 3.無節幼體的分離與收集技術 分離和收集無節幼體的方法很多,主要是利用無節幼體的趨光性和淡水比重來將無 節幼體與空殼及未孵化的蟲卵分開,前者只適合於實驗室,大量生產上不適宜,在 大量生產上適用的還是利用淡水來分離出無節幼體。具體操作方法為:停止鹵蟲孵 化缸中的充氣,將充氣管、氣石從孵化缸中取出,在孵化缸頂上覆蓋一塊黑布,使 缸內呈黑暗狀態。靜置孵化水10—15分鐘後(空殼會上浮),自底部將無節幼體和 未孵化的卵虹吸到網目為125μm的篩絹網袋內,此過程應儘量避免混入空殼。濾去 網袋內多餘的海水,得到無節幼體及未孵化的卵粒的膏狀混合物。將此混合物放在 盛淡水的盆中,並將盆傾斜靜置3分鐘,此時無節幼體會沉聚於靠近底部的水層中 而未孵化的蟲卵則沉降於盆底。用虹吸管將無節幼體吸入網袋中,濾去淡水,可得 到無節幼體(這時的無節幼體可直接投喂育苗物件也可冷藏),將盆底的蟲卵吸 出,放回孵化缸重新進行孵化。 七、鹵蟲卵去殼與應用 由於無節幼體與未孵化的卵、卵殼難以分離,投喂時就不可避免地將大量卵殼和未 孵化的卵連同無節幼體一起投到育苗池中,這些卵殼和未孵化的卵,不但會因為腐 爛或帶有細菌而使水質污染或導致病害,而且某些養殖動物會因吞食卵殼和未孵化 的卵而引起腸梗阻,甚至死亡。這個問題可通過蟲卵去殼而得到解決,即用化學方 法除去蟲卵的咖啡色外殼而不影響胚胎的活力。 1.鹵蟲卵吸水:蟲卵只有充分吸水膨脹呈圓形後才能完全除去外殼,大部分品系的 鹵蟲要浸泡於25℃的淡水或海水中1—2小時後方可達到充分吸水,充分吸水所需的 時間隨溫度增加及鹽度減少而縮短。但要注意浸泡在水中的時間不能太長,否則對 去殼後的蟲卵的孵化率、孵化速度均有不良影響。如果吸水後的蟲卵來不及用次氯 酸鹽處理,則可暫時保存於冰箱下層(0—4℃)。當充分吸水後,用網目125μm的 篩網收集並且輕輕擠去多餘的水分,然後放入次氯酸鹽溶液進行去殼。 2.配製去殼溶液和去殼:鹵蟲卵殼的主要成分是脂蛋白和正鐵血紅素,去殼原理就 是利用次氯酸鈉或次氯酸鈣溶液氧化去除這些物質。常用的去殼溶液是次氯酸鹽 [NaClO或Ca(ClO)2]、酸鹼度穩定劑和海水按一定比例配製而成。由於不同品系 鹵蟲卵殼的厚度不盡相同,因此要求去殼溶液中所含的有效氯濃度也不同。相同濃 度的去殼溶液,在相同條件下對不同品系的鹵蟲卵進行去殼時,去殼速度也不盡相 同,同時去殼過程中溫度的變化也不相同。一般而言,每克乾燥卵需使用含有 0.5克的有效氯,而去殼溶液的總體積按每克幹卵14毫升的比率配製。配製去殼溶 液需用NaOH(使用NaClO時用量為每克幹卵0.15克)或Na2CO3(使用Ca(ClO)2時 用量為每克幹卵0.67克;也可用CaO,用量為每克幹卵0.4克)來調節酸堿(pH) 在10以上。去殼溶液用海水配成,加上冰塊使水溫降至15—20℃。在配製 Ca(ClO)2去殼溶液時,應先將Ca(ClO)2溶解後再加Na2CO3或CaO,靜置後使用 上清液。以NaClO(俗稱漂白精)配製為例:假定漂白精有效氯含量為8%,如果要 對100克幹卵去殼,則需:漂白精:(100X0.5)/0.08=625克(漂白精的體積約為 600毫升);NaOH的量為100X0.15=15克;最終溶液體積為100X14=1400毫升; 需加水1400-600=800毫升。將吸水後的卵放入去殼液中去殼時,要不停地攪拌或充 氣,此時是一種放熱氧化作用,並產生氣泡,卵的顏色開始由咖啡色變成灰白色, 最後變成桔紅色。在去殼的過程中要不停地測定去殼溶液的溫度,可用冰塊防止溫 度升高到40℃以上。去殼時間一般為5—15分鐘,時間太長會影響孵化率。 3.清洗及停止去殼溶液的氧化作用:在解剖鏡下看不見咖啡色的卵殼時即表示去殼完畢 ,此時去殼溶液的溫度不再上升。用孔徑120—130μm的篩絹收集上述已除去外殼的鹵 蟲卵,用清潔的海水沖洗直到聞不出氯的氣味為止。由於即使聞不到氯的氣味,仍然 可能有氯殘留或吸附在無殼的卵,所以最好要進一步去除這些殘留的氯,用於去除殘 留氯的有鹽酸(HCl)或醋酸(CH3COOH),最好是用硫代硫酸鈉(Na2S2O3)。具體的 使用方法為將去殼卵放入0.1N的HCl,或是0.1N的CH3COOH溶液、或0.1N的Na2S2O3溶液 中1分鐘,然後用淡水或海水進行清洗。去氯情況可用0.1N濃度的碘鉀溶液(16.6克碘 化鉀溶於1升蒸餾水中)和澱粉溶液檢查。方法是取出少量已經去過氯的卵,加入0.1N 碘化鉀溶液和澱粉溶液,如果不出現藍色,表示氯已去除乾淨。去殼卵可直接使用, 也可脫水後貯存備用,但最好孵化後使用。 4.脫水及貯存:清洗及除氯後的去殼卵如要保存1周以上則須脫水。具體作法是先用網 目120μm篩絹收集蟲卵並濾去水分,然後浸泡於飽和鹵水中,飽和鹵水用量為每克 幹卵10毫升,浸泡2小時後需更換鹵水或再加一些粗鹽。脫水後的去殼蟲卵可保存於 冰箱中。上述保存於鹵水中的去殼卵的含水量約為16—20%,只能在數周內保持其原 有孵化率。如要保存更長的時間則要求含水量在10%以下,可用飽和氯化鎂(MgCl2) 溶液進行脫水。去殼卵在紫外線照射下不能孵化,因此在去殼過程中或是去殼後的蟲 卵保存均應避免陽光直射。魚蝦幼體可直接攝食去殼卵而且在消化上沒有問題,也減 少了孵化工作的麻煩;去殼卵在孵化時消耗的能量較少,因而孵化效率和每只無節幼 體的平均幹重均有顯著的提高。 5.去殼卵在水產養殖上應用的優點 在養殖和育苗中使用去殼卵已有多年的歷史並且優越性明顯。去殼時使用的次氯酸鹽 同時對蟲卵有消毒作用。在去殼鹵蟲卵加工的過程中,卵殼上細菌、真菌,特別是聚 縮蟲等全部被殺死,徹底杜絕了因鹵蟲卵消毒不嚴格而導致魚蝦苗疾病的傳播途徑, 因為去殼鹵蟲卵實際上是無菌的。卵去殼後,使用起來方便,可以直接進行投喂而且 在消化上沒有問題,無須再進行無節幼蟲與卵殼和未孵化卵的分離,這不僅節約許多 人力物力,而且徹底消除了卵殼帶來的危害。同時去殼卵不經孵化直接投喂,就完全 避免了蟲卵在孵化過程中能量的消耗,因而也就更為經濟。已有試驗證明去殼卵是數 種海淡水魚及甲殼類的優良餌料;也有實驗證明中國對蝦可以直接攝食去殼卵,並能 完成變態過程,而且只用去殼卵餵養黑褐新糠蝦也能使新糠蝦正常生長、脫皮和生殖 有些地區的卵去殼後,其孵化率可以提高,如加拿大Chaplin湖的卵,去殼後的孵化 率由49%增加到66%。去殼卵孵出的幼蟲較未去殼卵孵出的幼蟲含量高(有些品系甚至 會高10%以上),因為去殼卵節省了無節幼蟲出膜時所需的能量,這樣每只無節幼體 的平均幹重有顯著增加。用低孵化率的鹵蟲卵加工成的去殼鹵蟲卵,進行合理的投喂 ,可大大提高鹵蟲卵的利用率。a.可利用沒有孵化價值的低孵化率鹵蟲卵,加工成去 殼鹵蟲卵,則可全部被利用;b.也可把孵化後不能孵化的卵,再加工成去殼鹵蟲卵重 新被利用。這樣就為低孵化率的鹵蟲卵資源開闢了新的市場,同時去殼鹵蟲卵的加工 生產減少了不可預見的活餌料短缺的風險。總之,去殼鹵蟲卵是某些種類育苗與養殖 的一種優良餌料,可以單獨投喂,亦可與鹵蟲無節幼蟲混合投喂,而採取混合投喂的 方式則效果更好,早期幼體的活動能力較弱,合理投喂效果較好。 八、鹵蟲卵孵化特徵測定 1.孵化率(孵化百分比)測定:主要有以下3種方法。國際通用標準法,分為A法和B法 A方法:稱250mg鹵蟲卵,放入100ml鹽度為35?的海水,用1000lux連續光照,水溫 25℃,並充氣孵化。 ●1h後取10個樣品,每個樣品0.5ml,水中大約有100粒左右的鹵蟲卵。 ●取樣分別放在濾紙上,計數,取平均值C。 ●把濾紙上卵洗到培養皿裏,保持上面的條件相同進行孵化。 ●48h後,將孵出的幼體用魯哥氏碘液固定並計數,取平均值N。 ●計算孵化率:H%=100×(N/C)。 ●該方法只適用於經過標準化加工過程加工過的鹵蟲卵,即不帶空殼的,若標準偏 差大於5%,則表示取樣不準確,須重做。 B方法: ●稱250mg鹵蟲卵,放入100ml鹽度為35?的海水中,用1000lux連續光照,水溫25℃ ,並充氣、孵化。 ●48h後,取0.5ml,10個樣品;每個樣品大約有100個無節幼體和未孵化的卵於培養 皿中並用魯哥氏碘液固定。 ●計數每個樣品的無節幼體平均數為N。 ●加滴1滴氫氧化鈉溶液(40g氫氧化鈉加入100ml的蒸餾水),再滴5滴有效含氯為 5.25%的漂白水(次氯酸鈉)。數分鐘後,空殼溶解,未孵化的卵成為去殼卵。 用篩絹將去殼卵在自來水下沖洗,然後計數去殼卵個數、取平均值C。 ●計數孵化率:H%=100×N/(N+C)。 密度法 ●稱1g鹵蟲卵,放在1000ml鹽度為35?的海水中,浸泡2小時。 ●取1ml樣品於培養皿中(4個平行樣品)。 ●計數每個樣品中卵的平均值A(空殼和破卵不計數)。 ●1g鹵蟲卵(約為1000ml)放於28℃、Ph7.5-8.5、鹽度35?的海水中孵化,同時用 1000lux的光照。 ●36-48小時後,取1ml樣品於培養皿中(四個平行樣品),計數每個樣品平均數B。 ●計算孵化率:H%=100×B/A。 體重法 ●取1磅(453.592g)卵放入10噸海水中孵化,連續1000lux光照,溫度28℃。 ●20或48小時後收集幼體並稱重。 ●如果幼體體重950g左右,那麼這批鹵蟲卵的孵化率為70%左右。 ●如果幼體體重1250g左右,該批鹵蟲卵的孵化率為95%左右。 2.孵化效率的測定方法 ●稱250mg的鹵蟲卵放入80ml鹽度為35?的海水中,並在標準狀態下進行孵化。做3個 重複,最好使用錐形瓶且緩和地從底部充氣。 ●1h後再加入20ml海水,此時孵化瓶中的體積為100ml。搖均後取樣,每個樣品 0.25ml,取5-10個樣,取樣時要避免有氣泡。 ●樣品分別放置於5ml的小試管中 ●在每個小試管中加入4ml經過充分充氣的海水。 ●將小試管蓋好,然後放在轉速為5rpm(每分鐘5轉)的轉軸上。 ●在上述轉速下轉動,並保持標準的孵化條件。 ●48h後,每支小試管中滴入數滴魯哥氏碘液,將孵出的幼體固定、計數, 取平均值N,求出三個重複組的平均值。 ●孵化效率=每克卵孵出的無節幼體數=N×4×100×4 3.孵化速度的測定方法 ●稱250mg的鹵蟲卵放入盛有80ml鹽度為35?的海水的錐形瓶中,用1000lux連續光照 ,水溫25℃,並充氣孵化。 ●1h後加入20ml海水,使得總體積為100ml,並在100ml處的水位線上做一記號。 ●12h後,由於蒸發水位線下降,加入適量的水使水位保持出100ml處。再過1h後取 四個樣,每個樣品為0.25ml。 ●加魯哥氏碘液固定幼體,並計數無節幼體只數。 ●繼續每隔1h取樣一次,按上述方法取樣固定計數,直到連續三次取樣均得到相近 的無節幼體只數為止。在取樣過程中每隔三小時要增補蒸發掉的水分。 ●從每次取樣的無節幼體計數,可算出該時刻的效果(即每克蟲卵所能孵出的無節 幼體只數)。將最高孵化效率的值當做100%,計算出每次取樣與最高孵化效率的 百分比值,然後做出百分比值的經時變化圖,從圖上可找出10%的蟲卵孵出所需的 時間T10、50%的蟲卵孵出所需的時間T50、90%的蟲卵孵出所需的時間T90等。以 T90 —T10值越小越好,即說明同步性越好。 ꨭ---------------------------------------------------------------------------- 謝謝大家的觀看 如果有任何問題歡迎跟小弟我討論 -- 我的水中世界 一個我夢中的世界 http://www.wretch.cc/album/zzzown --



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