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先说这一篇会很长 如果不想要看的请先跳出去 这一篇是我从大陆某个网站偷来的 忘了是哪一个网站了 里面是写了一些丰年虾相关的科普资讯 我觉得不错啦 可以看看 若有啥问题欢迎讨论提问 小弟我对於丰年虾还算熟啦 ^^"" 之前作了些不同厂牌丰年虾的孵化率试验 以及看了些滋养丰年虾相关的论文 所以有兴趣的也可以欢迎大家一起讨论唷 ^^ ------------------------------------------------------------------------------ 卤虫的孵化、营养加强和应用 徐娟儿 福建省水产技术推广总站 一、 卤虫的分类地位、形态特徵和分布 1.分类地位:卤虫(Artemia spp.)有称盐水丰年虫、丰年虾、卤虫子、卤虾等,是一种 世界性分布的小型甲壳类。在分类学隶属於节肢动物门(Phylum Arthropoda),甲壳 纲(Class Crustacea),鳃足亚纲(Subclass Branchiopoda),无甲目(Order Anos taca),卤虫科(Family Artemiidae),卤虫属(Genus Artemia。) 2.形态特徵:卤虫的颜色与生活环境有关,一般在高盐水域呈红色,而在盐度较低的水中 呈白色。虫体较细长,全长1.2—1.5cm。明显地分为头、胸、腹部,不具头胸甲。头部 5节,5对头肢,分别是第一、第二触角、大颚、第一和第二小颚。胸部11节,有11对胸 肢。腹部由8节组成,不具附肢。卤虫发育有变态阶段。冬卵孵出的无节幼虫很小,体 长0.3-0.4mm,体宽0.25-0.30mm(包括附肢的基部),身体呈长椭圆形,不分节,具3 对附肢,呈淡肉红色。孵化3天后,幼虫生长到0.8-0.9mm,附肢加长,活动力加强,消 化道明显可见,复眼开始出现,体後部分隐约可见,此时进入後无节幼虫期。 3.分布:全世界已有300多个以上的盐湖或盐田发现卤虫,风及水鸟是传播卤虫的主要媒 介。目前在南美州及澳州的卤虫则是人们为了改进盐的品质或是为了发展水产养殖而移 殖的。在自然界卤虫一般出现在下列地区:能保持稳定高盐度(波美10-18度为宜), 因为在这种水域中才能排除卤虫的捕食者;或是在冬季有冰冻期,因为在冰冻的低温环 境,即使卤虫有机会吸水也无法进行新陈代谢不会孵化,可以存活到第二年春天;在有 明显的旱季及雨季的地区,例如东南亚的菲律宾、泰国、我国的东南部,虽然在旱季盐 田能保持一定的盐度,卤虫有充分生长的机会,但雨季时盐度骤然下降,捕食卤虫的动 物孳生而造成雨季过後卤虫消失。 我国卤虫分布极广,一般可分为沿海盐田和内陆盐湖区。我国沿海12个省、市、自治区 ,除了广东和上海未见调查资料外,其他地区均有卤虫分布,已发现卤虫分布点30多处 ,主要分布于长江以北,而集中产区在辽东湾、渤海湾和莱州周围,卤虫和卤虫卵产量 约占全国沿海产量的90%以上。中国内陆盐湖区已发现有卤虫分布的地区是内蒙、河北 、宁夏、甘肃、青海、新疆、山西、云南和西藏等9个省、自治区,共有卤虫分布点44 处,河北省是唯一既有沿海卤虫分布又有盐湖卤虫分布的省份。有大量卤虫的地区为 华北盐田、海南岛西岸盐田、山西运城盐湖、新疆艾比湖。卤虫在世界上其他地方分 布也很广泛,非州、大洋州、北美州、中美州及加勒比海、南美州、中亚及远东以及 欧州均有分布,其中以北美州、欧州的西班牙和前苏联等地分布点较多。 总的来说,卤虫的主要产地为我国北方海盐区的盐田,美国加州沿岸的盐田,犹他州 的大盐湖,加拿大、法国、西班牙及巴西东岸的盐田,其中除了巴西是1977年人为的 播种移植後传播开来的以外,其他均为本地原有的。目前主要的卤虫卵品牌有来自中国 、美国、加拿大、巴西、阿根廷、墨西哥、秘鲁、印度、伊朗、以色列、澳大利亚、 法国、义大利、独联体等20多个国家的不同地理品系。不同产地、不同品系的卤虫卵 品质不同,但以法国的拉瓦尔、巴西马考、义大利的马格里培、美国加利福尼亚州三 藩市湾、澳大利亚的沙克湾和中国天津等地出产的卤虫卵品质较优。 二、卤虫的生物学特性 不同产地的卤虫各自有对其生长环境的适应,但一般而言有以下特性: 1.温度:卤虫是广温性的动物,在6-35℃范围均可存活,但因产地的不同有所差异,有的 品系低於3℃时存活率为零,最适生长温度为25-30℃。而卤虫卵对温度的耐受力则要广 些,水分含量为2-5%的乾燥卤虫卵对外界环境因数有惊人的耐受力,例如将乾燥卤虫卵 放置於-273—60℃并不会影响其孵化率。短时间内放置於60-90℃也不会影响孵化率, 但在此温度范围内,随着温度的增高而耐受的时间减短。 2.水中的离子浓度:卤虫栖息的环境是多种多样的,按纬度来分生活与生活热带、亚热带 或温带;按离子种类来分有氯化钠型(如海盐区的盐田)、硫酸盐型(如新疆的艾比湖 、加拿大的卓别林湖)、碳酸盐型(如美国加州的摩洛湖)及钾盐型(美国的尼布拉斯 加盐湖),卤虫不但能耐受比海水中主要离子浓度更高的浓度,同时也能耐受最低的浓 度。 3.溶解氧、pH值:卤虫适应溶解氧的能力极强,如在1ppm这样极低溶氧状态下可生存,也 可生活於溶氧为饱和溶氧量的150%的环境中。卤虫天然生长的环境为中性到硷性,而孵 化用水的pH值以8—9为宜,当pH值降到8以下时会降低孵化率。 4.盐度:卤虫耐盐范围很广一般为3—330?,但并不是所有的卤虫品系耐盐都在此范围内 ,有些品系在5?的盐度下,死亡率很高,如美国大盐湖卤虫以及中国青岛卤虫就不能在 3?的盐度下生存,而且卤虫生长的不同阶段耐盐性也不同,卤虫的幼虫对低盐度适应能 力较强,在实验室培养下,Be′2的存活率高於90%,低盐度时比高盐度的存活率高,但 成熟之後存活率下降。由於卤虫没有任何攻击及自卫能力,因此很容易被鱼、甲壳类、 昆虫、水鸟等肉食性动物捕食,所以在天然海水中是不会看到卤虫的。在我国北方的盐 场在Be′6、7度以上才可见到卤虫。但盐度接近饱和盐水时(高於Be′25),由於高盐 度对卤虫生理上的压力及毒性,卤虫无法忍耐而死亡。 5.摄食特性:卤虫是一种典型的滤食生物,对食物没有选择性,可摄食数微米至50μm的 颗粒状物质,摄入率较高的为颗粒大小5—16μm的物质,摄食的方式为不停地摆动胸足 使部分水流流入口腔,同时摄取水流中的颗粒。天然卤虫摄取的食物有细菌、微藻及有 机碎屑等,卤虫的大量出现通常与微藻的大量生长相配合的,所以在实验室条件下,用 微藻如杜氏藻培养卤虫即可获得良好的生长结果。 6.繁殖特性:卤虫有两类,一类为孤雌生殖卤虫,一类是两性生殖卤虫。一般认为,孤雌 生殖卤虫和两性生殖卤虫即使生活在同一地区,也存在生殖隔离现象,它们之间是种间 的差别。至今已描述的卤虫品系已超过150种,已确定的两性生殖卤虫有6种,国内的卤 虫品系多是行孤雌生殖的,有报导山西运城盐湖等地的卤虫行两性生殖。 卤虫的繁殖期北方一般为4月份—11月份。有卵生和卵胎生两种生殖方式,卵生是指子代 以卵的方式自母体内产出,卵胎生指子代自母体内产出时是已孵化为小的无节幼虫。雌 性卤虫的生殖系统能形成两种类型的卵—冬卵和夏卵。关於控制产冬卵和夏卵的机制还 不清楚,但一般认为环境条件好时产夏卵,条件较差时产冬卵。夏卵在育卵囊内发育至 无节幼虫时才产出,此为卵胎生,这种生殖方式能迅速地增加卤虫的数量。冬卵(又称 休眠卵、耐久卵)的外面包有一层厚厚的卵壳,是卵壳腺分泌形成的,这种卵在雌体的 育卵囊内发育至约4000个细胞即停止发育并进入滞育期,产其後不经一定条件的刺激不 能孵化,这就是通常在水产养殖中所使用的卤虫卵。耐久卵在一定条件下,中止滞育, 启动孵化生理,重新开始胚胎发育,最後孵化为无节幼虫。 三、卤虫的营养价值、营养强化及其在水产养殖中的应用 1.卤虫的营养价值:卤虫是水产动物育苗生产中的重要生物饵料,但不同品系的卤虫作为 饵料的效果并非相同,因为不同品系的卤虫营养成分有很大的差异,但与喂养效果最有 关的是必需脂肪酸(EFA)尤其是高度不饱和脂肪酸(HUFA)的含量及组成,特别是 18:3ω3、18:4ω3、20:5ω3这三种含量。研究表明18:3ω3、18:4ω3是淡水种类 所必须的脂肪酸,因此在淡水养殖中要选择18:3ω3、18:4ω3含量高的品系如美国圣 保罗湾、美国犹他和美国三藩市某些批号的卤虫;20:5ω3是海产动物所必须的脂肪酸 ,因此在海水鱼虾育苗中要尽可能选择20:5ω3含量高的品系ꄊ 2.卤虫的营养强化:实际上就是对卤虫无节幼体进行营养强化,卤虫幼体所含的营养成分 对鱼类的生长速度、抗病力及成活率等均有重要的影响。在各种营养成分中,以n—3系 列中不饱和脂肪酸,特别是20:5ω3(EPA)和22:6ω3(DHA)的含量对饵料效果影响 明显,因此可对卤虫无节幼虫用富含EPA和DHA的物质进行强化。由於卤虫的初孵无节幼 虫摄食能力差,一般不用微藻强化。目前使用的是直接用强化剂强化,这类强化剂含有 多种不饱和脂肪酸和维生素,是经乳化制成的乳浊液,使用时比较容易与水混合,一般 是从鱼油、乌贼油等海洋动物中提取的。强化剂的品牌很多,不同的型号的强化剂所含 的成分不完全相同,使用时应根据其使用说明操作。 3.在水产养殖中的应用:卤虫的无节幼体已广泛用於育苗,而人们对无节幼体以外的各期 幼体及成体的利用也逐渐的增多,这是因为卤虫成体有相当高的营养价值,含有60%蛋 白质和丰富的各种必须氨基酸和多聚不饱和脂肪酸,此外还含有较多的维生素、激素及 胡萝卜素,而且成体的外壳很薄(小於1μ),不必预先加工即可直接投喂许多水产养 殖动物的幼体和成体,效果比配合饲料好,巴西和泰国分别用鲜活投喂对虾的後期幼体 和遮目鱼的稚鱼均得到良好的饵料效果,我国北方天然卤虫比较丰富的地区(如河北、 山东等盐田较多的沿海地区)已大量用於海水动物人工育苗,鲜活卤虫作为家禽的饲料 也有多年的历史了,美国的加州及巴西的盐田均有大量的鲜活卤虫出售,而在泰国、菲 律宾和西澳大利亚则有人工养殖卤虫出售成体。卤虫成体也可作为观赏鱼的饵料;鲜活 卤虫还可以用在将鱼虾苗从育苗室(人为控制的环境)过渡到室外养成池的饵料;也可 用于天然鱼虾苗经运输後比较衰弱时的饵料。另外,由於卤虫含有较多的脱皮激素,已 有实验表明用卤虫成体喂养对虾可促进亲虾的成熟。除了可直接做水产养殖物件的饵料 ,卤虫在非州、美州的一些土着食用晒乾的卤虫,泰国将卤虫制成虾酱供人们食用,在 美国、新西兰等国的市场出售一种“卤虫薄饼”的加工品,味道类似干虾,较可口,做 保健食品,销路看好。同时由於卤虫蛋白质含量丰富,是鱼类和甲壳类的良好饵料,且 容易饲养,天然资源量大,可取代部分鱼粉作为水产养殖业最重要的蛋白源。 四、卤虫的研究概况 卤虫的研究自1775年开始,至今已有200多年的历史,自从20世纪30年代美国的Seale (1933)和挪威的Rollefsen(1939)等发现卤虫的无节幼体是鱼类的最佳饵料後,卤虫 就逐渐成为海水养殖中最重要的饵料。20世纪60年代,随着水产养殖的兴起,卤虫越来 越多地被利用於养殖业,卤虫价格逐日上升,20世纪70年代末、80年代初巴西、泰国、菲 律宾、印度等国开展了卤虫大面积人工移殖、增养殖等试验,比利时、美国等则进行卤 虫室内高密度精养技术的研究。联合国开发合作署和比利时等国的开发合作组织,对国 际上的卤虫养殖和研究活动经费提供资助,并且於1978年在比例时的肯特大学设立了涵 盖各学科的“国际卤虫研究中心“,协调各国的卤虫研究,同时还不定期的举办卤虫研究 培训班、不定期出版卤虫科技简讯(报导与卤虫研究、卤虫应用有关的最新资讯)。迄 今为止,在卤虫的形态、品系特徵、生态学、遗产、放射生物学、毒理学、生理、生化 、分子生物学、代谢与发育学、与核酸及核?酸代谢有关的?、基因的结构、养殖及卤虫ꘊ 在殖上应用等方面均有所研究,并取得一定的进展。 国从1958年即开始把卤虫的无节幼体应用於海产稚鱼的饵料,同时也开展了对卤虫卵的 采集、孵化和培养的研究。1975年陈清潮等开展了对我国卤虫卵资源全面调查,并提出了 低温冷冻处理卤虫冬卵,将卤虫卵的孵化率提高约20%;20世纪80年代开展了较多的对卤虫 研究,其中有去壳卵的试验和饵料效果的营养分析等,80年代中、後期青岛海洋大学(今 中国海洋大学)的水产系、生物系做了许多卤虫基础方面的工作,其中包括生物学的测定 、孵化率、实验生态学、生殖、分类、药物载体和电泳等方面研究。养殖方面在我国主要 是进行室内小型培养卤虫,中试水准的不多1982年青岛海大水产系李德尚首先进行了室外 卤虫养殖,平均91.5公斤,1987-1988年该校生物进行了卤虫养殖技术研究,亩产为231.5 —255公斤,1988-1989年该校水产系孙世春等也进行了此项研究,亩产491.6公斤。近年 来我国在卤虫卵加工工艺、提高孵化率方面多了较多工作。 五、卤虫卵的品质评价 卤虫卵的品质可以从两个方面来评价,对养殖者而言,理想的饵料生物是来源可靠,而且 使用时操作方便,卤虫卵完全能适合於这个特点。因为卤虫的无节幼体可以从虫卵孵化而 得到,而且卤虫卵也已商品化可以买到。又由於卤虫无节幼体对各种环境有很广泛的耐受 力,即使操作过程非常粗心也不致于完全失败。同时卤虫可以做为或载体而解决一些不易 投喂物质的投喂方法。唯一不足的是不同的卤虫品系间存在着多方面的差异。对养殖者而 言,必须具有较好的物理特性及营养价值。在物理特性方面,只要在孵化前经过消毒或去 壳处理,基本上可以满足养殖物件幼体的摄食,最常发生的问题是卤虫无节幼体的大小, 尤其是那些体长大於428μm的幼体比较不易被某些海产鱼虾的幼体所摄食。卤虫卵的品质 必须从多方面评价,但主要的评价项目有孵化品质、虫卵及无节幼体的生物学测定值、脂 肪酸组成及含量分析、实际的饵料效果或喂养试验等。 1.卤虫卵的孵化品质:不同的卤虫品系其孵化品质有很大的不同,收 获的方法和虫卵加工、贮藏时间和条件以及不同孵化环境也影响孵化品质。在得到某一 品系的卤虫卵时,首先检查卤虫卵是否处於密封、真空、避光的状态,如果不是真空装 罐或是充氮气,在室温有氧环境下,存放数月後孵化率即会下降,在极低温下(如—20℃ )冷冻,可增加耐久卵的成活期,但如果低温保存,使用前必须提前1—2个月放在室温 ,否则会降低孵化率。卤虫卵从肉眼观察颗粒大小要均匀、颜色一致、无杂质(掺有沙 、盐、泥、裂的卵壳、空壳及其它有机物会使孵化时水中细菌大量繁殖造成水质恶化, 直接或间接影响孵化品质)。对於湿卵(以水份为物件)摸时一般以手摸能散开,无冰 晶、水份约在4%左右为好;而对於干卵一般以乾燥度高、分散度佳为好。从嗅觉方面来갊 闻一闻,一般以无臭味的品质较好。进一步用解剖镜观察大小、杂质、空壳多少,同时 还要看是否有凹陷(有凹陷为好)。除了这些外在观察外,衡量卤虫卵孵化品质的最主 要标准有以下四个指标。 (1)孵化率(孵化百分率或百分比):指每百粒虫卵所能孵化出的无节幼体个数。优质 虫卵的孵化率90%以上。孵化率不能表示出杂质及空壳含量等。 (2)孵化效率:每克卤虫虫卵所能孵化出的无节幼体个数。最高孵化效率为30万无节幼 体/克虫卵。这个数值可表示出卤虫卵的孵出情况和杂质含量,但是不能表示出无节 幼体的大小和重量。 (3)孵化量:每克虫卵能孵化出的无节幼体的总干重(毫克)。最高孵化量为600毫克干 重/克干虫卵。孵化量最能表示出虫卵的品质,是最可靠的一种卤虫卵品质评价方法。 (4)孵化速度:这个数值可以表示卤虫卵孵化快慢及同步性。在水温25℃的天然海水中똊 i行孵化时得到的最佳孵化速度是15小时开始出现无节幼体,而後的5个小时内有90% 的卤虫卵孵出。根据孵化速度可以计算出何时收集孵出的无节幼体,以便得到含有 高能量的无节幼体。 2.卤虫卵的生物学测定: 不同品系的卤虫卵及其所孵出的无节幼体的大小不同,卵壳的厚度亦不相同。卵壳薄孵 化较快,且有用成分的相对含量较高。另外,无节幼体的大小对於不同育苗物件的摄食븊 应性也不同,无节幼体的大小直接决定了是否能被鱼虾幼体摄食,是决定饵料效果的因 数之一。大部分的经济水产动物的幼体在开口之初先摄食微藻(50μm),然後摄取100 —200μm大小的浮游动物,如轮虫之後以大於200μm的浮游动物(如卤虫的无节幼体等ꄊ 为饵料。由於不同产地的卤虫卵其孵化出的无节幼体大小不一,因此可根据鱼虾不同或 随鱼虾发育阶段不同选择合适的卤虫无节幼体来投喂。孵出的卤虫无节幼体体长小的只 有410μm左右,大的可达520μm左右,有人认为只要卤虫无节幼体的大小不大到妨碍捕 食者的摄食,一般是越大越好,因为可以省去捕食者的能量,但也有人认为无节幼体小 单位体积所含的无节幼体数目多,那麽幼苗摄取卤虫无节幼体的机会也多。总之,可以 按照需求不同来选择不同品系的卤虫卵。 3.卤虫无节幼体的脂肪酸含量及组成成分分析不同脂肪酸(特别是ω3系列高度不饱和脂 肪酸)的含量和组成对养殖动物的饵料效果有重大影响,因为养殖动物的某些必须不 饱和脂肪酸只有从食物才能获得。脂肪酸含量和组成可用气相色谱或高压液相色谱来测 定分析。若不可能做到这一点,那麽在使用卤虫无节幼体之前,不管何种品系卤虫,有 必要进行给饵前的高度不饱和脂肪酸的强化,因为同一品系的卤虫其无节幼体的脂肪酸 含量也并非一成不变,同一品系卤虫可能由於采收季节的不同,其高度不饱和脂肪酸含 量可能有很大的不同,这可能是卤虫摄食不同营养成分的饵料而引起的。 4.从喂养效果来测定饵料效果 即通过养殖动物的增重及生长发育等情况来判断卤虫卵的优劣。当要分析某一品系卤虫 在营养成分上是否有缺陷、或是含有污染物时,最好先进行喂养试验,肯定了喂养效果 之後再大量地用於育苗。喂养试验可以在育苗物件上进行也可采用其他易操作的动物, 不论用什麽动物进行试验均要先把试验条件标准化。试验条件包括:水质、水温、盐度 、充气量、光照(包括光照强度及光周期)、供试验动物放养密度、卤虫无节幼体的密 度、投喂的次数、试验期的长短、重复次数等,每次试验均要同时进行一组正对照(用 卤虫参考中心的标准卵或是某一品质较稳定的品系的卤虫卵对照组不投喂任何饵料做为 负对照组。 六、卤虫卵发育、孵化与无节幼体分离技术 1.卤虫卵发育:卤虫卵在盐度较低时即能充分吸水成为圆球形,此时卵内的胚胎开始有 生理代谢活动,吸水24小时後,卵的外壳裂开,露出胚胎(实为被一层孵化膜所包围) ,数小时後,胚胎完全脱离了外壳但仍然吊在外壳下,此期为称为伞期,但胚胎发育成 为无节幼体时,无节幼体的附肢开始运动,使孵化膜破裂而游出。刚孵化的无节幼体称 为Ⅰ龄期幼体,体长为400-500μm,因为这时体内还有卵黄,因此用肉眼看为浅桔色, 有三对附肢,分别为有感觉功能的第一触角、有运动及滤食功能的第二触角和有摄食功 能的一对大颚。此期的幼体在头部有一个单眼,胸部有叶口及肛门均为关闭的,因此无 法摄食。12小时後Ⅰ龄期幼体脱皮发育成Ⅱ龄期幼体,从这时起开始摄食,由第二触角 的运动可射入大小为40μm以下的颗粒,如细菌、微藻和有机碎屑等。从孵化到成体约 需脱皮15次,随着脱皮各器官进行分化,例如在胸部长出成对的胸肢,头部长出一对复 眼等。在X龄期幼体之後形态上有明显的变化,第二触角失去运动功能而分化成性器官。 雄性的第二触角发育成斧状抱器,而雌体的第二触角则退化成感觉器官。 2.卤虫卵孵化:一般认为将虫卵放入海水中即可孵化,但要大量孵化卤虫卵得到高密度的 无节幼体则受孵化条件和孵化方法影响。 (1)孵化条件:卤虫卵的孵化一般在孵化桶、罐、槽中充气进行。孵化率是衡量虫卵的 孵化效果和虫卵品质的尺度。孵化率是指孵化卵数占虫卵总数的百分数。除虫卵品 质外,影响孵化率的因数有下列几个: 温度:当水的温度在-18—4℃或32—40℃时,卤虫卵的胚胎不会死亡,但不会孵化 ;当水温在4—32℃之间时,随着温度的升高,胚胎的代谢加强。在生产上的孵化温 度一般维持在25—30℃为宜,以28℃为最好。温度25℃以下孵化时间延长,温度 33℃以上时,过高的温度会使胚胎发育停止。孵化过程最好保持恒温,以保证孵化ꘊ 同步进行,同时也有利於无节幼体的收集。 盐度:卤虫卵在天然海水甚至在盐度为100?的卤水中都能孵化,但一般在较淡的海 水中孵化率较高。常用正常海水、人工海水或用粗盐配制的盐度为20—30?的孵化水 为好,如埕口盐场、莺歌海盐场和柯柯盐场的卤虫卵最适盐度分别为30?、20?和35? ,但有些品牌的卤虫卵推荐使用的盐度为15?。 pH:一般以8—9之间为佳。由於在孵化过程中产生大量的CO2,因此,在生产上大量 、高密度孵化时一定要加NaHCO3用来中和产生的CO2,以保证pH值不低於8.0。每升孵 化水加1-2克的NaHCO3可稳定孵化用水的pH。 溶解氧和充气:在孵化缸的底部放置足够的充气石,孵化过程中需连续充气,使水 体翻滚,避免在缸底形成死角,从而防止卵堆积、缺氧死亡。生产上一般溶解氧维 持在2毫克/升的水准可得到最佳的孵化效果。因而对充气量应作适当的控制,不宜 过大,使虫卵能均匀分布而又能避免机械损伤。 光照:适宜的光照对卤虫孵化初期的胚胎发育有促进作用,提高虫卵孵化率,所以 虫卵浸泡淡水充分吸水1小时内光照是至关重要的。一般用2000lux的光照即能取得 最佳效果。孵化时常采用人工光照,用日光灯或白炽等从孵化缸的上方照明。 卤虫卵密度:卤虫卵的密度以虫卵的品质来定,优质虫卵(孵化率85%以上)适宜密 度为5克干重/升,一般采用1-3克干重/升。否则密度过大时为了维持足够的溶解氧, 要加大充气量,而充气量过大时,不但会产生较多的泡沫使虫卵黏附对孵化不利, 而且也可能会使无节幼体受伤。 卤虫卵的消毒:由於卤虫卵外壳上常常带有大量的细菌、霉菌孢子及有机碎屑,当 水温较高而且是大量孵化时,常引起细菌等大量繁殖,使水中的溶解氧降低以及孵 化用水变得混浊而降低孵化率,同时用带有大量细菌情况下孵出的无节幼体投喂也 易使鱼虾发病,因此,如果卤虫卵是未经消毒加工处理的粗品时,一定要经过消毒 处理後使用,处理方法有:漂白粉或漂白精、去壳、双氧水以及甲醛溶液等处理。 (2)孵化方法:孵化用缸最好是具锥形底的玻璃钢桶或是透明的塑胶袋。用前要对孵 化缸进行消毒处理,孵化前卤虫卵常用淡水浸泡1至数小时,使虫卵充分吸水,以 加快孵化速度,减少孵化过程中能量消耗。为了杀灭虫卵表面黏附细菌,孵化前 要对虫卵进行消毒,一般用2%—3%的福马林浸泡10—15分钟,或用每立方米水体ꐊ 之中200克的有效氯浸泡20分钟。在上述孵化条件下,卤虫卵经过24—36小时即可 孵化出无节幼体。 3.无节幼体的分离与收集技术 分离和收集无节幼体的方法很多,主要是利用无节幼体的趋光性和淡水比重来将无 节幼体与空壳及未孵化的虫卵分开,前者只适合於实验室,大量生产上不适宜,在 大量生产上适用的还是利用淡水来分离出无节幼体。具体操作方法为:停止卤虫孵 化缸中的充气,将充气管、气石从孵化缸中取出,在孵化缸顶上覆盖一块黑布,使 缸内呈黑暗状态。静置孵化水10—15分钟後(空壳会上浮),自底部将无节幼体和 未孵化的卵虹吸到网目为125μm的筛绢网袋内,此过程应尽量避免混入空壳。滤去 网袋内多余的海水,得到无节幼体及未孵化的卵粒的膏状混合物。将此混合物放在 盛淡水的盆中,并将盆倾斜静置3分钟,此时无节幼体会沉聚於靠近底部的水层中 而未孵化的虫卵则沉降於盆底。用虹吸管将无节幼体吸入网袋中,滤去淡水,可得 到无节幼体(这时的无节幼体可直接投喂育苗物件也可冷藏),将盆底的虫卵吸 出,放回孵化缸重新进行孵化。 七、卤虫卵去壳与应用 由於无节幼体与未孵化的卵、卵壳难以分离,投喂时就不可避免地将大量卵壳和未 孵化的卵连同无节幼体一起投到育苗池中,这些卵壳和未孵化的卵,不但会因为腐 烂或带有细菌而使水质污染或导致病害,而且某些养殖动物会因吞食卵壳和未孵化 的卵而引起肠梗阻,甚至死亡。这个问题可通过虫卵去壳而得到解决,即用化学方 法除去虫卵的咖啡色外壳而不影响胚胎的活力。 1.卤虫卵吸水:虫卵只有充分吸水膨胀呈圆形後才能完全除去外壳,大部分品系的 卤虫要浸泡於25℃的淡水或海水中1—2小时後方可达到充分吸水,充分吸水所需的 时间随温度增加及盐度减少而缩短。但要注意浸泡在水中的时间不能太长,否则对 去壳後的虫卵的孵化率、孵化速度均有不良影响。如果吸水後的虫卵来不及用次氯 酸盐处理,则可暂时保存於冰箱下层(0—4℃)。当充分吸水後,用网目125μm的 筛网收集并且轻轻挤去多余的水分,然後放入次氯酸盐溶液进行去壳。 2.配制去壳溶液和去壳:卤虫卵壳的主要成分是脂蛋白和正铁血红素,去壳原理就 是利用次氯酸钠或次氯酸钙溶液氧化去除这些物质。常用的去壳溶液是次氯酸盐 [NaClO或Ca(ClO)2]、酸硷度稳定剂和海水按一定比例配制而成。由於不同品系 卤虫卵壳的厚度不尽相同,因此要求去壳溶液中所含的有效氯浓度也不同。相同浓 度的去壳溶液,在相同条件下对不同品系的卤虫卵进行去壳时,去壳速度也不尽相 同,同时去壳过程中温度的变化也不相同。一般而言,每克乾燥卵需使用含有 0.5克的有效氯,而去壳溶液的总体积按每克干卵14毫升的比率配制。配制去壳溶 液需用NaOH(使用NaClO时用量为每克干卵0.15克)或Na2CO3(使用Ca(ClO)2时 用量为每克干卵0.67克;也可用CaO,用量为每克干卵0.4克)来调节酸碱(pH) 在10以上。去壳溶液用海水配成,加上冰块使水温降至15—20℃。在配制 Ca(ClO)2去壳溶液时,应先将Ca(ClO)2溶解後再加Na2CO3或CaO,静置後使用 上清液。以NaClO(俗称漂白精)配制为例:假定漂白精有效氯含量为8%,如果要 对100克干卵去壳,则需:漂白精:(100X0.5)/0.08=625克(漂白精的体积约为 600毫升);NaOH的量为100X0.15=15克;最终溶液体积为100X14=1400毫升; 需加水1400-600=800毫升。将吸水後的卵放入去壳液中去壳时,要不停地搅拌或充 气,此时是一种放热氧化作用,并产生气泡,卵的颜色开始由咖啡色变成灰白色, 最後变成桔红色。在去壳的过程中要不停地测定去壳溶液的温度,可用冰块防止温 度升高到40℃以上。去壳时间一般为5—15分钟,时间太长会影响孵化率。 3.清洗及停止去壳溶液的氧化作用:在解剖镜下看不见咖啡色的卵壳时即表示去壳完毕 ,此时去壳溶液的温度不再上升。用孔径120—130μm的筛绢收集上述已除去外壳的卤 虫卵,用清洁的海水冲洗直到闻不出氯的气味为止。由於即使闻不到氯的气味,仍然 可能有氯残留或吸附在无壳的卵,所以最好要进一步去除这些残留的氯,用於去除残 留氯的有盐酸(HCl)或醋酸(CH3COOH),最好是用硫代硫酸钠(Na2S2O3)。具体的 使用方法为将去壳卵放入0.1N的HCl,或是0.1N的CH3COOH溶液、或0.1N的Na2S2O3溶液 中1分钟,然後用淡水或海水进行清洗。去氯情况可用0.1N浓度的碘钾溶液(16.6克碘 化钾溶於1升蒸馏水中)和淀粉溶液检查。方法是取出少量已经去过氯的卵,加入0.1N 碘化钾溶液和淀粉溶液,如果不出现蓝色,表示氯已去除乾净。去壳卵可直接使用, 也可脱水後贮存备用,但最好孵化後使用。 4.脱水及贮存:清洗及除氯後的去壳卵如要保存1周以上则须脱水。具体作法是先用网 目120μm筛绢收集虫卵并滤去水分,然後浸泡於饱和卤水中,饱和卤水用量为每克 干卵10毫升,浸泡2小时後需更换卤水或再加一些粗盐。脱水後的去壳虫卵可保存於 冰箱中。上述保存於卤水中的去壳卵的含水量约为16—20%,只能在数周内保持其原 有孵化率。如要保存更长的时间则要求含水量在10%以下,可用饱和氯化镁(MgCl2) 溶液进行脱水。去壳卵在紫外线照射下不能孵化,因此在去壳过程中或是去壳後的虫 卵保存均应避免阳光直射。鱼虾幼体可直接摄食去壳卵而且在消化上没有问题,也减 少了孵化工作的麻烦;去壳卵在孵化时消耗的能量较少,因而孵化效率和每只无节幼 体的平均干重均有显着的提高。 5.去壳卵在水产养殖上应用的优点 在养殖和育苗中使用去壳卵已有多年的历史并且优越性明显。去壳时使用的次氯酸盐 同时对虫卵有消毒作用。在去壳卤虫卵加工的过程中,卵壳上细菌、真菌,特别是聚 缩虫等全部被杀死,彻底杜绝了因卤虫卵消毒不严格而导致鱼虾苗疾病的传播途径, 因为去壳卤虫卵实际上是无菌的。卵去壳後,使用起来方便,可以直接进行投喂而且 在消化上没有问题,无须再进行无节幼虫与卵壳和未孵化卵的分离,这不仅节约许多 人力物力,而且彻底消除了卵壳带来的危害。同时去壳卵不经孵化直接投喂,就完全 避免了虫卵在孵化过程中能量的消耗,因而也就更为经济。已有试验证明去壳卵是数 种海淡水鱼及甲壳类的优良饵料;也有实验证明中国对虾可以直接摄食去壳卵,并能 完成变态过程,而且只用去壳卵喂养黑褐新糠虾也能使新糠虾正常生长、脱皮和生殖 有些地区的卵去壳後,其孵化率可以提高,如加拿大Chaplin湖的卵,去壳後的孵化 率由49%增加到66%。去壳卵孵出的幼虫较未去壳卵孵出的幼虫含量高(有些品系甚至 会高10%以上),因为去壳卵节省了无节幼虫出膜时所需的能量,这样每只无节幼体 的平均干重有显着增加。用低孵化率的卤虫卵加工成的去壳卤虫卵,进行合理的投喂 ,可大大提高卤虫卵的利用率。a.可利用没有孵化价值的低孵化率卤虫卵,加工成去 壳卤虫卵,则可全部被利用;b.也可把孵化後不能孵化的卵,再加工成去壳卤虫卵重 新被利用。这样就为低孵化率的卤虫卵资源开辟了新的市场,同时去壳卤虫卵的加工 生产减少了不可预见的活饵料短缺的风险。总之,去壳卤虫卵是某些种类育苗与养殖 的一种优良饵料,可以单独投喂,亦可与卤虫无节幼虫混合投喂,而采取混合投喂的 方式则效果更好,早期幼体的活动能力较弱,合理投喂效果较好。 八、卤虫卵孵化特徵测定 1.孵化率(孵化百分比)测定:主要有以下3种方法。国际通用标准法,分为A法和B法 A方法:称250mg卤虫卵,放入100ml盐度为35?的海水,用1000lux连续光照,水温 25℃,并充气孵化。 ●1h後取10个样品,每个样品0.5ml,水中大约有100粒左右的卤虫卵。 ●取样分别放在滤纸上,计数,取平均值C。 ●把滤纸上卵洗到培养皿里,保持上面的条件相同进行孵化。 ●48h後,将孵出的幼体用鲁哥氏碘液固定并计数,取平均值N。 ●计算孵化率:H%=100×(N/C)。 ●该方法只适用於经过标准化加工过程加工过的卤虫卵,即不带空壳的,若标准偏 差大於5%,则表示取样不准确,须重做。 B方法: ●称250mg卤虫卵,放入100ml盐度为35?的海水中,用1000lux连续光照,水温25℃ ,并充气、孵化。 ●48h後,取0.5ml,10个样品;每个样品大约有100个无节幼体和未孵化的卵於培养 皿中并用鲁哥氏碘液固定。 ●计数每个样品的无节幼体平均数为N。 ●加滴1滴氢氧化钠溶液(40g氢氧化钠加入100ml的蒸馏水),再滴5滴有效含氯为 5.25%的漂白水(次氯酸钠)。数分钟後,空壳溶解,未孵化的卵成为去壳卵。 用筛绢将去壳卵在自来水下冲洗,然後计数去壳卵个数、取平均值C。 ●计数孵化率:H%=100×N/(N+C)。 密度法 ●称1g卤虫卵,放在1000ml盐度为35?的海水中,浸泡2小时。 ●取1ml样品於培养皿中(4个平行样品)。 ●计数每个样品中卵的平均值A(空壳和破卵不计数)。 ●1g卤虫卵(约为1000ml)放於28℃、Ph7.5-8.5、盐度35?的海水中孵化,同时用 1000lux的光照。 ●36-48小时後,取1ml样品於培养皿中(四个平行样品),计数每个样品平均数B。 ●计算孵化率:H%=100×B/A。 体重法 ●取1磅(453.592g)卵放入10吨海水中孵化,连续1000lux光照,温度28℃。 ●20或48小时後收集幼体并称重。 ●如果幼体体重950g左右,那麽这批卤虫卵的孵化率为70%左右。 ●如果幼体体重1250g左右,该批卤虫卵的孵化率为95%左右。 2.孵化效率的测定方法 ●称250mg的卤虫卵放入80ml盐度为35?的海水中,并在标准状态下进行孵化。做3个 重复,最好使用锥形瓶且缓和地从底部充气。 ●1h後再加入20ml海水,此时孵化瓶中的体积为100ml。摇均後取样,每个样品 0.25ml,取5-10个样,取样时要避免有气泡。 ●样品分别放置於5ml的小试管中 ●在每个小试管中加入4ml经过充分充气的海水。 ●将小试管盖好,然後放在转速为5rpm(每分钟5转)的转轴上。 ●在上述转速下转动,并保持标准的孵化条件。 ●48h後,每支小试管中滴入数滴鲁哥氏碘液,将孵出的幼体固定、计数, 取平均值N,求出三个重复组的平均值。 ●孵化效率=每克卵孵出的无节幼体数=N×4×100×4 3.孵化速度的测定方法 ●称250mg的卤虫卵放入盛有80ml盐度为35?的海水的锥形瓶中,用1000lux连续光照 ,水温25℃,并充气孵化。 ●1h後加入20ml海水,使得总体积为100ml,并在100ml处的水位线上做一记号。 ●12h後,由於蒸发水位线下降,加入适量的水使水位保持出100ml处。再过1h後取 四个样,每个样品为0.25ml。 ●加鲁哥氏碘液固定幼体,并计数无节幼体只数。 ●继续每隔1h取样一次,按上述方法取样固定计数,直到连续三次取样均得到相近 的无节幼体只数为止。在取样过程中每隔三小时要增补蒸发掉的水分。 ●从每次取样的无节幼体计数,可算出该时刻的效果(即每克虫卵所能孵出的无节 幼体只数)。将最高孵化效率的值当做100%,计算出每次取样与最高孵化效率的 百分比值,然後做出百分比值的经时变化图,从图上可找出10%的虫卵孵出所需的 时间T10、50%的虫卵孵出所需的时间T50、90%的虫卵孵出所需的时间T90等。以 T90 —T10值越小越好,即说明同步性越好。 ꨭ---------------------------------------------------------------------------- 谢谢大家的观看 如果有任何问题欢迎跟小弟我讨论 -- 我的水中世界 一个我梦中的世界 http://www.wretch.cc/album/zzzown --
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