作者laevulose ()
看板Biotech
标题[方法] 处理cycloheximide後蛋白的normalization
时间Thu Jun 6 19:13:35 2013
最近念paper看到的实验
作者想看A蛋白是否可以stablize B蛋白
於是使用cycloheximide treat细胞
(因为cycloheximide可抑制translation)
作者先对细胞pretreat A蛋白
再加入cycloheximide
之後收不同时间的cell lysate做WB侦测B蛋白
另外侦测tubulin当作loading control
吊诡的是
既然cycloheximide会抑制translation
那不是也会抑制tubilin的translation吗?
这样还可以用tubulin来normalize吗?
还是说
因为加的剂量一样
所以tubulin应该会被抑制相同的量(?)
因此一般的housekeeping gene仍然可以拿来做normalize?
还请版上各位先进为小妹解惑
谢谢!
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◆ From: 140.112.84.204
1F：推 aceliang:half-life 长短是关键 06/06 21:11
2F：→ williamyang:推楼上 06/06 23:12
3F：推 mesenchymal:推一楼 06/07 09:55
4F：→ laevulose:!! 所以说 只要B蛋白半衰期比tubulin短就可以以tubilin 06/07 19:49
5F：→ laevulose:做normalization罗!? 06/07 19:49
6F：→ williamyang:tubulin的half-life大约是两天 06/08 05:16
7F：→ laevulose:了解!谢谢楼上各位~ 06/09 20:37