作者greenpeace29 (修)
看板Biotech
标题[求救] 以LPS刺激RAW264.7的剂量
时间Sun Feb 17 22:25:11 2013
请问大家在以LPS刺激RAW264.7时 LPS都下多少呢?
我要测刺激後上清中cytokine的分泌量
之前我用实验室旧的raw 养在10%FBS+DMEM中
下LPS 160ng/ml, 刺激24hr
测到TNF alpha 有3000多pg/ml
IL-6只有30多pg/ml
後来向食工所买了新的raw, 同样以160ng/ml刺激24hr
测到TNF alpha有5000多pg/ml
但IL-6只有不到10pg 囧
也测不到IL-1b, IL-12
是这样的剂量还不足以刺激他吗?!
查了文献发现不少人LPS下到micro等级,当然也有只用100ng的
想问问看大家意见.
谢谢 (_ _)
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 175.180.181.115
1F：→ utadalove:细胞数? 96-well?? 02/18 10:03
2F：→ greenpeace29:种在96well 每个2x10^4 100ul 02/18 12:36
3F：推 robin:LPS浓度够 试试细胞数2x10^5吧~~ 02/18 17:13
4F：→ greenpeace29:最後浓度是2x10^5没错 上面打的是每well有的细胞数 02/18 21:59
5F：→ greenpeace29:意思是LPS下到160ng/ml应该就能刺激吗?谢谢 02/18 22:00
6F：推 robin:拍谢 没写清楚 我是说每well种2x10^5的细胞 ~~ 02/19 06:08
7F：推 jasonstudio:LPS是SIGMA的吧? 不同菌株有差 原厂MSDS都有建议剂量 02/21 19:25
8F：→ jasonstudio:你如果用055那个 浓度可以很低 买它细胞专用的那个 02/21 19:26
9F：→ jasonstudio:原厂建议是1ug 建议你先看看手上的lps的来源 02/21 19:28
10F：→ jasonstudio:细胞数这样很OK 拉到10^5 如果有先放24H的话会太满 02/21 19:31
11F：推 c1314205:working 1ug/ml 02/21 19:50
12F：→ greenpeace29:了解,谢谢楼上几位!!:) 02/21 21:40