作者FireHell (冥煌 = 好硬)
看板Biotech
标题Re: [求救] sample抑癌效果突然下降
时间Sun Nov 6 19:40:38 2011
※ 引述《FireHell (冥煌 = 好硬)》之铭言：
: 我的细胞是Hep 3B
: sample是一种三萜类纯物质，溶解在DMSO
: 平常冰-20度C，使用前会加温到50度C (37度C不会完全溶解)
: 细胞我会控制代数前後差异不超过7代
: sample已知光稳定、热稳定(70度C没问题)
: 最近发现treat同样的浓度、时间
: MTT的存活率从4X%上升到8X%
: 请问各位高手是哪里有问题呢？
: 目前想到的是可能反覆解冻会使sample degrade
: 不过我的sample是很稳定的应该还好吧？
: 有时後购买一些药会写说不可以反覆解冻，原理是什麽呢？
: 感谢回答 :)
不好意思回覆自己的文，真的是鬼打墙了
烦请各位高手帮我点出问题所在，感激不尽
我配了新的stock，保存於常温（避免反覆解冻）、避光
旧的stock保存於-20度C，使用前加温至50度C、避光
以同样浓度、时间做了以下测试
（细胞代数是以我个人第一批冻起来的视为第一代计算）
旧stock treat第三代细胞 → viability = 8X%
新stock treat第三代细胞 → viability = 9X%
旧stock treat第七代细胞 → viability = 9X%
出乎意料的新stock还比较没效一点
不过存活率这麽高，跟我之前持续数月稳定的4X%（旧stock）比起来真的差太多了
Medium是用一样的货号，FBS也是用一样的"批"号（我treat时会用2% FBS medium）
Incubator内的CO2浓度、水蒸气量都正常
实在是想不到为什麽sample会突然没效，请教各位高手，感激不尽>"<
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◆ From: 140.112.98.115
※ 编辑: FireHell 来自: 140.112.98.115 (11/06 19:41)
1F：→ dota01:会不会是之前做MTT的那管stock浓度配错阿 11/06 19:47
2F：→ FireHell:基本上不可能，因为我的sample难溶，我都配10 mM是极限了 11/06 19:50
3F：→ FireHell:如果配更浓的话一定不会完全溶解 11/06 19:51
4F：→ FireHell:附带一提，我treat时的DMSO浓度都控制在0.3% 11/06 19:51
5F：→ keeny:check cell confluency b4 treatment MTT被细胞数影响颇大 11/07 02:23
6F：→ keeny:你的情形我猜是cell over confluent. 11/07 02:25
7F：→ FireHell:请问楼上指的是细胞密度太高吗？我是5000 cells/well 11/07 13:33
8F：推 ararthur:microplasma? 曾经因此原因而药效大降 11/07 14:22