作者premire (热腾腾的泡面)
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标题[讨论] 关於酵素动力学疑问（测量superoxide dismutase活性）
时间Sun Sep 4 10:20:14 2011
小弟目前依照文献上的各项试剂浓度制备：
(1) cytochrome C : 10 μM
(2) xanthine : 60 μM
(3) xanthine oxidase : 3 mU
先以 0.05 M potassium phosphate buffer/0.1 mM EDTA作为blank
依照(1)--> (2)--> (3)顺序加入 测VIS 550 nm
(interval:10 second, duration 40 min)
文献提到要观察到cyt C的吸光值增加速率达到 0.02/min才可以当作control rate
(范围0.0125~0.025均可)
不过小弟尝试结果 初始速率仅有0.001/min上下
曾经把酵素活性提高到20 mU 但结果顶多到0.002左右
另外也把xanthine浓度提高也没办法看到显着的速率增加
因此受质和酵素均提高 没办法看到速率增加 不知道是那边出了问题
可否请有经验大大为小弟解惑 感激不尽!!!
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