作者mgh225 (..)
看板Biotech
标题[求救] RNase A treat
时间Thu Jun 23 12:39:25 2011
因为在 extract plasmid 并 digest 後， 跑电泳时 bands smear的很严重
老师认为应该是因为 RNA 没有处理乾净
所以叫我用 RNase A 去retreat
我看一般使用的 protocol 好像有说到 treat 完後要使用 PCI 才不会影响後续实验
但是我接下来要做的是 gel extraction 和 ligation
那麽 PCI 的步骤是否还是必要的呢???
谢谢大家的指导
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◆ From: 140.112.79.51
1F：推 micocat:请问你是怎麽抽plasmid的 未加RE digest的DNA有smear吗 06/23 13:28
2F：推 aceliang:看你是要切来干麽的...其实RE digest时加Rnase也行 06/23 13:40
3F：推 Ianthegood:对阿我们都和在solution 1里面 06/23 13:42
4F：→ Ianthegood:不过电泳应该就会把protein跑开了啦 06/23 13:42
5F：推 roy047:有做clean up 或是gel extraction 纯化後即可 06/23 15:09
6F：→ roy047:不过抽的plasmid如果smear太严重的话.. 步骤应该也有问题@@ 06/23 15:10
7F：→ jimmyshen17:我怎麽觉得是RE digest的问题... 06/23 15:52
8F：→ mgh225:谢谢各位提供的意见 但RE不就加一加吗 会可能有什麽问题呢 06/23 19:37
9F：推 aceliang:......是加一加没错啦...但是他在里面作用问题可多了... 06/23 19:39
10F：→ a90648:PCR也是加一加啊!! 但是就是会P不出东西来，问题多的很... 06/24 00:58
11F：推 icome:建议用kit抽 现在mini都蛮便宜的 速度快品质也很稳定 06/24 21:16