作者starjim (Jim)
看板Biotech
标题[求救] RT遇到的问题
时间Wed Jun 8 20:10:13 2011
想请问板上的各位高手
因为我在做RT时，Oligo dT 和dNTP会先混在一起(各0.5ul)
接着再加1ul到各个sample
但现在遇到问题了
由於这次sample较多~因此在我各加完1 ul之後
发现混合的那管还剩下1ul，各个sample加完那1ul之後体绩是6.5ul
因此我把pippet调成6.5ul去吸每个sample
发现都刚好~而我也确定我在配olgo dT+dNTP时没有多配
那假如这部分有问题的话RT做出来会有什麽样的影响??
谢谢~~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 203.71.94.31
1F：推 Realthugz:体积这麽小 误差很正常... 前提是你没有少加一组就好了 06/08 20:54
2F：推 jk15:我觉得RT的成功与否跟RNA的quality比较有关... 06/08 23:03
3F：→ jk15:真的怕的话 pipet送去校正吧@@" 06/08 23:04
4F：→ shenhsu:一定会有误差的..所以我们实验室都是多配1管 省点就多半管 06/09 02:12
5F：→ shenhsu:每管加的量都一样还有多 总比最後一管少了加不到来的好~ 06/09 02:13
6F：推 cocodo:没有影响的，敝实验室pipet的误差都在2uL以上，还是可以RT 06/11 08:21
7F：→ cocodo:而且RNA quality比较重要，可以跑个internal control 的PCR 06/11 08:24
8F：→ cocodo:确认一下RNA qualiry 06/11 08:26
9F：→ cocodo:我是说RT之後的product 啾咪 06/11 08:28