作者mikis1107 (mikis1107)
看板Biotech
标题[求救] 请问冷冻切片萤光染色的小黄点..
时间Wed May 11 11:14:35 2011
我想请问冷冻切片的免疫萤光染色结果
sample组上面出现的小黄点是甚麽东西
有方法可以避免吗?
http://ppt.cc/xR(M
实验方法
去OCT
lysotracker 50 nM, 37度, 40 min
PBS wash
4% paraformaldehyde固定 RT 10 min
wash
1% BSA RT 50 min
wash
一级抗体 in 1% BSA 4度 O/N
wash
二级抗体(488) in 1% BSA 37度 15 min
wash
Hochest 1:4000 RT 15 min
wash, mounting
有询问过学姊
因为rat heat是自己取的有洗的比较乾净
而sample是请别人取的
说可能是红血球没有清洗乾净的关系@@
学姊有建议我可以用biotin放大目标蛋白的讯号
就是一级抗体+二级抗体接biotin+三级抗体接biotin
(应该是这样吧@@)
不过还是想要询问其他人的意见
卡了有一阵子
感谢感谢^^
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