作者euphonium15 (心动梦幻)
看板Biotech
标题[实验] 电泳胶体的制备
时间Fri Mar 25 14:51:02 2011
※ [本文转录自 Master_D 看板 #1DYt-rqO ]
作者: euphonium15 (心动梦幻) 看板: Master_D
标题: [实验] 电泳胶体的制备
时间: Fri Mar 25 01:30:27 2011
※ [本文转录自 Chemistry 看板 #1DYt3U7g ]
作者: euphonium15 (心动梦幻) 看板: Chemistry
标题: [实验] 电泳胶体的制备
时间: Fri Mar 25 00:27:08 2011
原PO的领域不是做电泳相关研究~
电泳实验也从来没有碰过~更不用说要制备胶体Orz
如今碰到了一点问题~想来询问有经验的板友~
详情如下:
原PO前几天接获老板指示要根据一篇文献制作Diffusive Gels出来~
看了一下所需要的药品~
1. Acrylamide
2. Agarose cross-linker
3. Ammonium persulfate
4. TEMED
上网查了一些资料~发现似乎跟跑电泳用的胶体类似~
根据文献~原PO使用了下面的步骤:
1. 25mL 15% Acrylamide+7.5mL 0.3% Agarose+ 17.5mL DI Water当stock solution.
2. 取10mL stock solution加入70uL Ammonium persulfate以及20uL TEMED充分混合.
3. 装入holder後,迅速放入约40度左右的烘箱约60分钟.
理论上出来的应该是跟果冻一样的胶体才对~不过原PO做出来的应该只能说是胶水Orz
不知道是哪里出了问题~理论上应该跟文献有一样的结果才对~
自己的猜测:
1. 因为使用的药品跟文献的厂牌不一样,导致成胶的能力也会略有差异?
如果是这样的话,是否加入多一点Ammonium persulfate或是TEMED可以改善呢?
2. 因为文献制作出来的Diffusive Gels厚度只有0.4mm之间.
原PO只是先行测试成胶的能力,因此只是大概找个holder让它成形而已.
厚度大概有1-2mm左右,不知道厚度会不会影响到成胶的能力?
3. 此外文献为了让gel成形,使用了两片玻璃将其夹住後再放入烘箱.
原因同2.一样,原PO只是先行测试成胶的能力好坏,并没有这样处理.
不知道这会不会也是关键的因素之一呢?
希望有经验的板友可以给点意见~总比一个人在那瞎子摸象好XD
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1F：→ novelfun:可以去biotech问看看? 03/25 11:22
2F：→ euphonium15:感谢您的建议^^ 03/25 14:50
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