作者ganbaol (ganbaol)
看板Biotech
标题Re: [讨论] 农杆菌生化检测相关及水稻种子 RNA 纯ꐠ…
时间Mon Feb 14 01:00:24 2011
一. 其实很难测不到耶.....农杆菌长的像鼻涕一样...长的比 E-coli 慢很多
从外观和生长速度就可以大概判定是不是农杆菌,你可以试试看不要分四区,
就不客气的给他稍微画多一点(比如说话一个爱心XD),养约48小时,
再倒入本氏液, 30min 後就会看到 plate 外围有一圈黄色的沉淀物
二. 淀粉吸水膨胀...没听说过这种状况耶....囧
还是换一个配方看看, 用 tris. SDS(20%). EDTA . DTT 复合的配方一样可以
破种子,每个 lab 用的浓度都不一样,可以再查查看吧
※ 引述《goldfish0909 (金鱼)》之铭言:
: 各位版上的前辈们好
: 小弟我在实验上遇到一些问题,想请教一下大家,问题叙述如下:
: 一、农杆菌生化检测
: 挑取生长在 YEP (5 ppm rifampicin) EHA105 单一菌落,培养至 Lactose agar (
: 1% lactose, 0.1% Yeast extract, 2% agar),以本氏液 (50 mM CuSO4.5H2O, 0.5M
: sodium citrate dihydrate, 0.9 M Na2CO3) 检测。在 lactose agar 上分成四区划
: 不同管 stock 菌液,每一区以 100 ul 本氏液染色,但在菌体周围无看到黄色环带
: 不晓得是哪里出了问题? 还是哪位大大有照片提供给我参考一下
: 二、成熟水稻种子 RNA 纯化
: 我是用 5 颗成熟种子以液态氮磨成粉末,加入 1 mL TRIzol 混合,再加入 200 ul
: 氯仿,以 13000 rpm 离心 15 分钟,发现种子所含淀粉吸水膨胀,完全无上清液可
: 取用,请有经验的大大们提供一下办法,感激不尽~~
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 118.171.87.60
1F:推 goldfish0909:感谢大大的回文建议,划爱心很幽默 ~~ 02/15 22:09