作者FENOR (FENOR)
看板Biotech
标题[求救] DMSO对於细菌的伤害程度
时间Mon Oct 11 10:41:02 2010
小弟我在mutagenesis的过程中加入了DMSO(因为太过GC-rich)
然後在PCR跑完之後就直接拿去transform，
(transform:1. mix on ice 20min
2. heat shock 90sec
3. recover with LB 40 min)
然後过了大约十六小时後长出了两颗colony
但是抽出来测浓度的时候却显示我没有抽出任何东西!
那两颗很可能好死不死是抗kanamycin的杂菌......
我想请问一下，再加入了DMSO的情况下，
PCR跑完之後是不是去做clean up会比较好?
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◆ From: 140.112.125.84
1F：→ tsubasawolfy:哪一牌的kit跟comptent cell? 10/11 11:42
2F：→ FENOR:quickchange DH5a 10/11 12:58
3F：推 tsubasawolfy:quickchange的quick soultion我觉得就是dmso..特性一 10/11 13:11
4F：→ tsubasawolfy:样．．另外照他标准的protocl取那2ul不足以影响到 10/11 13:11
5F：→ tsubasawolfy:ecoli的生长 而且你也欠缺tramsform的positive contr 10/11 13:12
6F：→ tsubasawolfy:ol (DH5A会不会把linear form DNA 接成plasmid ??) 10/11 13:13
7F：→ blence:DH5a是可以把nick接起来,但原po应该先跑胶确认产物再transf 10/11 14:44