作者puec2 (^^y)
看板Biotech
标题Re: [求救] 送大的植体进DH5啊法~
时间Wed Dec 30 20:37:44 2009
※ 引述《juwoo (redeye)》之铭言：
: 受学长姐之命要送个16Kb的plasmid进DH5a
: 但是不论用电的用烫的(heat shock)都没办法把他老大请到菌里...
: 也不知道是不是Ligation的问题= =
: 接的方法是7K+9K一平一钝的方法黏接
: 请问板上的各位高手有甚麽好的意见
: 谢谢
: (__)
我也遇过这个问题，建议你
1. 减低plate中抗生素浓度。
2. 放在室温培养。
3. 再不行就换菌株。
我猜猜看，plasmid里面是病毒吗？
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 211.76.175.170
1F：推 hchs890843:突然想到~~做这麽龟毛的vector一定要recover 1 hr再涂 12/31 00:46
2F：→ spirithorse:heatshock 42度3分钟,冰上3分钟,加SOC(42度) 01/02 20:48
3F：→ spirithorse:再incubator一个半小时到两个小时 01/02 20:48
4F：推 juwoo:不是病毒@@ 01/05 10:10
5F：→ juwoo:我有incubator2小时了 01/05 10:11
6F：→ juwoo:42度3分钟菌不会死吗@@? 01/05 12:37