作者JoyHuang (不想改...)
看板Biotech
标题Re: [求救] Raw细胞分化成 OC
时间Mon Nov 2 11:47:17 2009
这几天看来,似乎没有版众愿意回答....
或许是撇步不容易在文字中叙述清楚吧!
不知道大家知道有哪间实验室有在做类似实验,能够去讨教的呢?
谢谢!
: 标题: [求救] Raw细胞分化成 OC
: 时间: Thu Oct 29 17:09:33 2009
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: 最近实验要开始做将 RAW 264.7 分化成 osteoclast 细胞的实验。
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: 根据paper所叙述,加入 RANKL 50 ng/mL 处理五天後,
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: 染 TRAP 若看到三核即为 osteoclast
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: 第一次实验细胞数量没抓对,五天处理下来,细胞数量爆高。
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: 相互堆叠,造成辨认的困难。
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: 第二次实验将细胞数减至1/4 ,五天处理下来,细胞大约只占了整个well的不到五成。
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: 而且并没有观察到有比较大的细胞产生(因为osteoclast是三核,应该会比较大颗)
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: 对於positive control竟然没有分化现象出现,想上来求救一下。
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: 看板上是否有其他人实验室曾做这种实验,希望可以求教!
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: 另外,染TRAP部分。因为我们把细胞种在 24 well中处理,
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: TRAP染色也是直接把染剂丢进去。
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: 却发现这样无法使用高倍的倒立式显微镜观察。
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: 请问其他人是怎样处理种在well中的细胞呢?
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: 应该去找正立高倍的显微镜?或是有其他方法可以处理?
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: 谢谢
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