作者slash7788 (800公里的,答案)
看板Biotech
标题[求救] 有关HL-60
时间Fri Sep 25 19:05:09 2009
最近养了一只HL-60(本人所养的第一只飘的细胞)
stock是和别人拿的 听说是冻在7%DMSO
我处理的方法是 解冻後 加10ml meduim
PRMI-1640 with L-glutamine
10%FBS
1% P/S/A
dilute掉DMSO的毒性
之後大概隔两天 在换medium
不过medium就只加5ml下去养
在过大概四天 测细胞数 只有3*10 5次方
而且 细胞已经有成团的感觉了 但是就是没办法满盘
就算再换medium 也是差不多的结果
想请问 有谁养过这只细胞 可以给点帮助吗
或是谁家有这只细胞 可以分一管 stock让我养看看
感恩~~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.128.67.245
1F:→ popo7340:变成团了表示这 细胞不能用了...一定要一颗一颗的才可以 09/25 22:29
2F:→ popo7340:还有就是他在解冻的时候~~一开始会长很慢是正常... 09/25 22:30
3F:→ popo7340:稳定之後就会长比较快..但一定是一颗一 颗的 09/25 22:31
4F:推 echo:you sure HL-60 可以冻? 我们前阵子跟ATCC买 cell line 09/26 12:59
5F:→ echo:他们给的不是冷冻的....@@ 09/26 13:00
6F:推 silentence:依经验解冻後要两星期才会较稳定 固定sub成团现象就会 09/26 18:05
7F:→ silentence:减少了-- 09/26 18:05
8F:→ silentence:而且它好像没办法养很满-- 到了10^6/mL就有点不太动了 09/26 18:06
9F:→ popo7340:HL60基本上要用甘油冻~~他对DMSO很敏感~~食工所有写原因 09/26 21:56
10F:→ popo7340:通常状况不好就会结团~~很难再分开~~这是我遇到的情形 09/26 21:57
11F:推 cocoon121:可是我用别的实验室给的细胞 他有细胞凝聚现像耶@@ 09/28 23:06
12F:→ popo7340:我的是一颗一颗ㄝ~~~ 09/28 23:40