谢谢大家的帮助 不过我又有个问题 就是细菌里面也有transmembrane protein 那这些蛋白质在细菌中是怎麽folding的呢 他们应该没有ER吧 感谢之前某版友帮忙查资料 回文里面有写 "their N-terminal domains targeted to the ER lumen during synthesis " 希望知道的人可为小弟解惑 感激不尽! ※ 引述《YuDavid (讨厌失眠)》之铭言： : 各位高手大家好 : 由於时间有点紧凑同时基础知识又不够紮实 : 所以来这边请教 与此同时我也会多查点资料做功课 : 谢谢各位 : 首先 三月份开始我们老板就叫我们表达一个叫做PepT1的protein : 这个蛋白是一个有12个transmembrane region的transporter : 由於对实验基础知识缺乏 : 今天才知道 原来transmembrane蛋白质没办法表达 囧 : 至少似乎用传统的方法(IPTG induction)是没有东西的@@ : 那问题来了 : 我们有个同学说 会不会是因为他是binding在膜上 : 所以你不可能把target protein给钓出来 跑PAGE当然就没有band了 : 但是又有个同学说你在E.coli系统里面做的蛋白未必也会乖乖binding在细胞膜上 : 而可能是疏水作用力（跨膜区域是疏水的）的关系所以translation无法顺利进行 : 请问Transmembrane蛋白无法表达的问题是上述哪种 或者还有别的原因呢? : 那有没有比较特别的方式/技术 可以把我们要的蛋白给做出来呢? : 另外 我们本来傻呼呼的想要做抗体 以後做western甚至IHC : 假设真的表达不出来 我们只表达某段exterior的部分 : 作western 应该不会有问题吧? : IHC似乎就不太可能了吧？ : 因为这个实验的抗体要求似乎非常高　囧 : 主要的问题如上 : 感谢各位花时间阅读并指教 --

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