作者tinsly (...)
看板Biotech
标题[求救] 关於作磷酸化蛋白质的IMAC
时间Sun Jun 28 22:55:41 2009
事情是这样的....
我用 tube 做 SPE 萃取磷酸化蛋白质
之後用elution buffer (400mM NH4OH) 冲提
10 ul X2 binding 5min 离心 5min
之後抽乾去跑 SDSPAGE
结果回收率超差的 大约5% Orz
冲提过的particles有拿去打 MS ,想见就是冲的很不乾净
会用NH4OH 主要是大部分paper都用这个
我做出来的亮度跟paper比真的是差超多
想请问有没有人也是用NH4OH有做出来的
或是其他方式elute的 最高可以做到几%
感谢!!
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