作者SPK (云淡风轻)
看板Biotech
标题Re: [求救] 高剂量G418杀不死CHO及MB-231
时间Sun Jun 28 01:16:09 2009
※ 引述《wenhaoshen (wenhaoshen)》之铭言：
: 我使用刚配Sigma G418 (400ug/ul) select CHO-K1及MDA-MB-231,
: 有做不同的dilution剂量及细胞数,
: CHO-K1长很快,
: CHO-K1抓出来是1000ug/ul...但挑clone时候杀不太死CHO细胞,
: 後来调到1600ug/ul
: 而MDA-MB-231用1400 ug/ul G418去杀各不同dilution细胞数
: 连最低细胞数都杀不死
: 各位可提供我好用又纯又高剂量的G418 liquid,不是powder喔.
: 我去查都只有50mg/ml剂量...不知道有没有更高剂量可推荐呢?
: 谢谢
……我真的很惊奇你的细胞这麽“强壮“要用到这麽高剂量的G418~
我是觉得第一你的G418有没有配错，第二你的KILLING CURVE有没有做好~
还有，怎麽会是在开始做transfection selection的时候再调一次G418的浓度呢？
这样实验不就有很严重的基准点问题了吗？喔，对了，这跟细胞长不长得快没有关系~
最後，连最低细胞数都杀不死？？我觉得你可能拿错药了，那不是G418~~
更或者，你的细胞是从那来的？确定没被动过手脚吗？
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 219.69.66.235
1F：→ wenhaoshen:我也觉得很奇怪,G418对长得快的细胞很难杀 06/28 01:58
2F：→ wenhaoshen:绝对没拿错药,我想可能要重新重抓Killing Curve@@ 06/28 01:59
3F：推 leoblack:之前对於长很快的细胞~我们会用G418+FBS减半~效果不错 06/28 09:24
4F：推 aceliang:G418本身就是蛮强的药了...原po浓度都可以勾芡了 06/28 10:07
5F：推 bluep:推aceliang大，都可以勾芡了...哈 06/28 11:33
6F：推 westernblot:如果真的加1000mg/ml，细胞都咸死了...囧a 06/28 14:22