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最近老师给我一个protocol是关於抗体纯化用的 其中使用到NaN3这药品 我猜想他是拿来做沉淀用的~ 是这样吗?我在网路上找了一下~很像是不过我还是不能确定 请问有经验的大家一下! 另外一个问题:把E.coli sonication後拿去煮 这样其中的soluble protein不是大部分应该都会被热破坏 然後沉淀吗? 因为我学长要我以这样的方式去测定菌体的可溶蛋白含量 我想测蛋白浓度的蛋白基本上应该还是以soluble蛋白为主吧 如果aggregate怎麽去测浓度呢? 是这样吗向大家求救了! --



※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.113.253.111
1F:推 enisx:避免细菌生长~~ 02/27 19:48
2F:推 CLDER: 好笑是会抑制粒线体中的酵素 终止传递练的动作 02/27 20:32
3F:推 mylover0126:看你的可溶性蛋白是不是耐热型的吧!如果是应该不至於 02/27 21:37
4F:→ mylover0126:问一下学长吧 02/27 21:38
5F:→ mournermind:恩恩我知道他可以拿来做抗菌剂!谢谢一楼跟二楼! 02/27 22:18
6F:→ mournermind:三楼大人~我要测的是E.coli本身的蛋白含量~不是表现的 02/27 22:20
7F:→ mournermind:那麽应该会影响吧?!! 02/27 22:21
8F:推 aggaci:那为什麽要煮?sonication+离心後也可以测啊 02/27 22:37
9F:推 kshsdeck:sonicate完 40000g一小时 上清液就是可溶性蛋白 不用煮 02/27 22:52
10F:推 kshsdeck:NaN3放在抗体溶液中是为了保存防腐用,看目的,也有人不加 02/27 23:05
11F:→ mournermind:嗯嗯谢谢楼上大人的解释^^ 纳我问个笨问题~NaN3是不是 03/01 17:40
12F:→ mournermind:对抗体本身会有影响?因为我学姐要我不要加~说宁可放在 03/01 17:41
13F:→ mournermind:-20重覆解冻使用~ 03/01 17:41
14F:推 boblu:1. NaN3 很毒 03/03 00:32
15F:→ boblu:2. NaN3 会影响 HRP 反应 03/03 00:33
16F:推 naturer:杀人XD 03/03 10:40
17F:推 sGoat:其实-20重覆解冻对抗体比较伤,放4度就好了... 03/11 08:30
18F:推 st92013:NaN3 不能加在HRP的2抗 1抗+远没影响也比用-20重复解冻好 03/12 16:46
19F:→ sneak: 避免细菌生长~~ https://daxiv.com 11/11 01:19
20F:→ sneak: -20重覆解冻使用~ https://muxiv.com 01/03 16:51







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