作者ararthur ()
看板Biotech
标题Re: [讨论] 存菌? 冻菌?
时间Fri Feb 27 15:17:49 2009
※ 引述《uolink (uolink)》之铭言:
: ※ 引述《ararthur ()》之铭言:
: : 抱歉抱歉
: : 基本上我是从某个存菌管中以loop沾菌涂plate
: : 挑选出正常的monocolony放到broth增菌
: : 而之後菌液则由假定的mutagen treat
: : 希望能使这株菌突变成功
: : 我将以一定的菌量在抗生素plate上涂盘
: : 如果实验组有比控制组的colonies数还多的话
: : 就认定此假定mutagen的致突变率是存在的
: : 所以回到问题本身
: : 我并不能把存在-80度的存菌管只挑起最上部的冰来养
: 这里的 -80 菌液哪来的? 我假设你是用 mutagen treat 过的菌液全部做冻管
恩 是这样没错
: : 因为这样可能没办法把握住大部分突变过後菌株
: : 例如突变後密度变高的菌都沉到了eppendorf底部的话
: : 这样就取不到他们了
: 你就把冻管慢慢挑 一次挖一点养 直到挖完为止
: 这样不就全都取到了吗?
所以是说 就全部挖到新的medium里culture吗
: : 统整到最後想问的就是
: : 是否有办法可以从存菌管中尽量的取出各株经突变过的菌
: : 又如果能渐融後vortex取菌是最合理的
: : 但存菌管的菌渐融後他们的健康状态是否仍安好呢?
: 不安好
: : 谢谢花时间收看
: : 希望能帮助我解答^^
: 你在一开始 mutagen treat 过的菌液 就应该要直接拿去涂盘了吧
: 去涂有该抗生素的盘子 不就可以筛出你要的抗药性突变了吗?
: 为何要去做冻管在挑出来养?
我并不是要专只筛出抗药性突变的菌株
而是计算他长时间的mutation rate增加情形
那如此一来每天配的plates antibiotics活性 或任何条件等等
都可能会影响其比较的准确度
所以当时是想说 把每天收集的菌液留下
可以最後一次做对照
把所有的condition都尽量统整到相同
这样来的比较才比较有可信度
不晓得这样想法有哪里有问题吗
: 你把他们混在一起养有一个问题: 竞争优势
唔 这是我没有注意到的...
但同在LB medium里
会有什麽竞争的影响吗
有没有什麽可能的例子呢??
谢谢你的回答
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