作者houselizard (壁虎)
看板Biotech
标题Re: [求救] 如何减少western control的量
时间Wed Dec 3 02:45:25 2008
1. Cold PBS was prevented to use in wash process, because temperature
shock maybe occurred in signaling test.
2. How about reduce serume to 1% ?
※ 引述《jackness (马的!!要拼老命了!)》之铭言:
: 小弟最近在做signaling pathway的define
: 我是用THP-1 cell 然後利用PMA使其分化成MACROPHAGE
: 然後加药看哪条PATHWAY会被TURN ON
: 但是我发现0分钟的 P-P38 OR P-JNK 都满高的 (COMPARE TO 加药的5~60分钟)
: 不知道该怎麽解决
: 有人有遇过类似的情形吗
: 我是分化成MACROPHAGE後
: 先用PBS WASH 後在加药(in medium+serum)
: 因为要洗去PMA
: 但是CONTROL的量却很多
: 不像一般照理来讲应该是没有的 = =
: 我也用过PBS WASH 後在加药(in complete mediume)
: 但还是没办法降低control 的磷酸量
: 希望聪明的大大可以帮帮忙 >"<
: 谢谢..
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 122.121.3.221
1F:推 jackness:喔..我是有让PBS回温 12/03 03:12