作者crement (cometoseeme)
看板Biotech
标题Re: [求救] flow cytometry的问题
时间Tue Sep 30 02:42:26 2008
我有遇过一模一样的问题,
买BD的抗体,搞了半天都搞不定。
结论是BD每种抗体跟每个LOT的浓度都不一样,
isotype跟专一性抗体浓度差很多,
可能差到十几倍以上。
打电话去问一下该批的浓度,
把iso跟专一抗体浓度调整成一样就好了。
另外部分厂牌包装开始会把浓度写在外面。
我有不爽打电话去BD抗议过,因为问这个浓度要他们去转问,
都要花上一两天的时间。
他们说大部分使用上没有这个问,并基於每批conjugate 萤光的程度不太一样,
所以出厂的时候浓度调整的的程度不一,
改变包装标示麻烦,所以不考虑标上去。
※ 引述《tcmakol ()》之铭言:
: 之前做flow时 自己接一抗二抗
: 都会做一组negative conrtol(不加一抗只加二抗)跟实验组比
: 都可以看到明显的向右移有 shift的情形
: 然後後来买了厂商接好的一抗带萤光
: 也是做一组negative conrtol(用isotype)跟实验组比
: 却发现有shift的情形 但是却是向左移
: 比negative control表现量还要少
: 同样的细胞以及组别跟设定
: 但结果却是向左移 做了好几次了 都是同样的结果
: 想请问各位高手 这样是哪里出了问题呢
: 拜托各位高手了
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这就是生活吗?!
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1F:推 damnedest:每一个LOT都要做titration 而且要用浓度单位 09/30 13:13