作者dreamysky (新绿园说不关了)
看板Biotech
标题[方法] ligation的问题...
时间Sat Sep 13 16:24:28 2008
我有一段要接进去的gene 大小约1K
可是他的前後接位都是EcoR1
vector 我有加CIAP 作用 37度 30 min
ligation volume控制在20 ul
mol为 Vector: 0.7 pmol
gene : 6 pmol
2 unit T4 ligase (genemark)
可是接不进去...
有请先进帮帮我...
我已经失败两周了...
PLEASE
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1F：推 enisx:我都做5 uL而耶... 16 度 overnight 09/13 16:39
2F：推 dankai:试试看overnight! 还有genemark的ligase我认为效率不太高~ 09/13 16:50
3F：→ dankai:跟promega比起来~我比较喜欢用promega~~呵! 09/13 16:51
4F：推 veltine:看看ligation buffer有没有沉淀…另外加ATP试试看… 09/13 17:21
5F：推 feng760804:OVERNIGHT+1 09/13 23:54
6F：推 ookubo:请问一下 你的接不进去 是怎样判定的？ 09/13 23:59
7F：→ blueashin:两周儿已= ="" 话说一开始我失败了两个月 09/15 01:45