※ 引述《teddybear209 (慧慧林)》之铭言： : 请问有人做过抽膜蛋白的实验吗 : 有kit可以直接抽吗 : 是否 : 可以提供网站或protocol? : 谢谢 kit颇贵 分享一下较一般的做法 用imidazole buffer(0.3M sucrose,25mM imidazole,1mM EDTA,pH7.2)把细胞刮下 并离心1000g,4度西,5 min pellet用1.5 mL imidazole buffer resuspend cells 把均质机调成1250rpm 来回缓慢打五次 接着离心4000g,4度西,15 min 取supernatants 把pellet在拿去做以上的动作在收一次supernatants 接着把supernatants离心200000g,4度西,1 hr 收下来的呈有点黄透明雾状pellet就是membrane protein 有学姐说用6M urea回溶还颇快的 想请问回溶这一步 大家用什麽buffer回溶? 谢谢~~ --

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