作者LIAR (堕天使)
看板Biotech
标题Re: [方法] 请问蛋白质浓度测定
时间Sat Jul 19 00:08:40 2008
※ 引述《muchmoa (...)》之铭言：
: 借用一下标题，
: 各位Bradford method蛋白质检量线是每次要测未知物时都会新作一条吗？
: 还是同一条检量线一用就是几个月呢？
: 最近发现自己和隔壁实验室的分光光度计
: 隔一天测相同浓度的BSA吸收值可以差到0.03~0.06
: 另外，Sigma的Total Protein Kit是依据和标准品的吸收值比值来计算浓度
: 看配方也是Bradford method，可是没有检量线的情况下这样准确吗？
: 我们实验室的检量线做出来的截距都在0.015~0.025之间，
: 这样就不是直接正比的关系了，还可以用Sigma的kit吗？
: 请指教一下，谢谢!!
检量线本来就是每次都要做吧？
我们用的是BCA protein assay，两个reagent，加上37度的时间，由於没有
end point，光这三个变因就很难完全一样了，所以每次都要standard至少二重复，
除了pipeting有没有准外，万一临时有事晚回来，整个时间就不一样了.....
不过反过来说，如果没有很要求准到很龟毛，或是「只想让大家都一样浓」，
这时我会偷懒，因为每次绝对值差不多)，只要OD还有线性，
甚至不放standard也OK，不过这种事绝对不可能写到protocal就是了。
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太初有道，道与耶和华同在，道就是耶和华。这道太初与耶和华同在。
万物乃藉祂所造，凡被造的没有一样不是藉着祂所造的。生命在祂里头，
这生命就是人的光。光照在黑暗里，黑暗却不接受光。
吾辈乃生於黑暗，行於黑暗。因神之指引，行向光明；又因撒旦诱惑，回归黑暗。
我不断地徘徊於光明与黑暗之间，从被造之日至今，又自今直到那审判之日的来临。
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