作者LIAR (堕天使)
看板Biotech
标题[闲聊] 请问有加SDS的tris buffer为什麽会不好滴定？
时间Fri Mar 28 22:10:35 2008
western有很多buffer，我的老师（别的实验室）要求他的学生所有buffer自己配，
连老师自己也是自己配，所以我也是自己google後自己配，不过光只有tris的话还
好，用HCl滴定没问题。
但只要有加SDS，pH meter就变得很不敏感，虽然有搅拌，但明明滴了不少HCl，
但pH meter却没变化，把pH meter拿起来重新用dd H2O水冲过再重测才会看到变化，
而且很快又会定住，所以一直定不准。
老师说tris直接定好再加SDS也可以，不过我想说最後pH比较准，而且加一堆东西後
会不会改变pH也不晓得，我的配方也是最後才加一句
"check the pH and bring it to pH 6.8"
所以想请问有人滴定过含SDS的buffer遇过我这种问题吗？请问怎麽解决呢？
--
太初有道，道与耶和华同在，道就是耶和华。这道太初与耶和华同在。
万物乃藉祂所造，凡被造的没有一样不是藉着祂所造的。生命在祂里头，
这生命就是人的光。光照在黑暗里，黑暗却不接受光。
吾辈乃生於黑暗，行於黑暗。因神之指引，行向光明；又因撒旦诱惑，回归黑暗。
我不断地徘徊於光明与黑暗之间，从被造之日至今，又自今直到那审判之日的来临。
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 123.192.3.78
1F：推 runpapa0520:TRIS有出专用的PH meter 贵很多，听说比较准，我没用 03/28 22:21
2F：→ LIAR:光tris还要用专用pH meter啊？不是只要温度补偿就好？ 03/28 22:26
3F：→ runpapa0520:我用一般的定也不会像你一样 最多幅度跳动点大 03/28 22:23
4F：推 aggaci:western blot什麽buffer需要加SDS而且还要调pH值的？ 03/28 22:43
5F：→ LIAR:sample buffer、running buffer、transfer... 03/28 22:44
6F：→ LIAR:我的不是跳动有点大，是根本不跳嘛！没SDS就没问题。 03/28 22:45
7F：推 aggaci:不需要调吧？至少我没调过，也没听说过(你是第一个) 03/28 22:47
8F：→ LIAR:怎麽会有SDS-PAGE不用调pH啊？ 03/28 22:52
9F：推 blence:Tris buffer主要的目的要稳定pH(所以才叫buffer阿),因此只 03/28 23:00
10F：→ blence:需要在准备stock时调好pH就好,不需要配好後又时时刻刻调pH 03/28 23:02
11F：推 ROKEE:推楼上，Tris本来就是缓冲用的 03/28 23:05
12F：→ blence:一般实验室就会准备pH6.8~8.5的Tris-HCI的stock备用,或者以 03/28 23:06
13F：→ blence:HEPES-KOH做类似功能的替代 03/28 23:09
14F：→ LIAR:不过有些buffer的tris很稀，这样先调好的不会被其他成份 03/28 23:41
15F：→ LIAR:加进去後而改变吗？ 03/28 23:42
16F：推 alaric:我实验室的,都是加一加药,定量体积,搅一搅全溶, 就可以. 03/29 00:01
17F：→ alaric:好久没测pH值.. 03/29 00:02
18F：→ LIAR:所以alaric也是有各种pH的TRIS配好stock罗？ 03/29 00:03
19F：推 limyeeshin:我是调好pH才加SDS欸 目前为止跑起来没问题 03/29 01:40
20F：推 tsubasawolfy:配Tris buffer没在加SDS(8.8 and 6.8) 做胶时才另外 03/29 08:24
21F：→ tsubasawolfy:加入10%SDS buffer 而且量很稀 我是觉得不会变动到 03/29 08:24
22F：→ tsubasawolfy:pH EX:TRIS体积3.8ml:10%SDS体积150uL 03/29 08:25
23F：推 allure1:Tris先定好 就把药加一加+1 03/29 17:31
24F：推 naturer:用试纸阿...:P 03/29 17:39