作者icome (我不是宅男 \("▔□▔)/)
看板Biotech
标题[问题] 用293T制造lentivirus
时间Fri Aug 31 14:23:59 2007
小弟目前是用中研院RNAi core的质体，
并依照中研院网站给的protocol下去试。
唯一跟protocol不一样的是，
我是用lipofectamine 2000来做293T的transfection，
并非使用建议的TransIT-LT1。
transfection的方法如下:
将细胞养在6cm dish，前一天seeding，隔天细胞约五分满，做transfection
DNA total 5ug, lipofectamine 10ul，使用OPTI-MEM，约6小时後换medium
做完隔天看细胞都还平安无事
到第三天准备收virus时发现细胞已经死了好多...
请问这是正常的吗?还是因为liposome加了太多才死掉的?
不知道板上各位先进是否有人做过这方面的技术，是否有什麽该注意的地方
虽然protocol已经写得蛮详尽的 但毕竟没人可以指教做起来怕怕的>"<
先感谢各位罗!
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A: Are you kidding?
B: No, I am serious.
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A: 你是凯蒂吗?
B: 不，我是喜瑞儿。
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.121.97
1F：推 driws:我们之前DNA跟lipofetamine 2000是1:1 细胞ok 09/02 12:17
2F：推 slowmove:本人试过一阵子,用他们建议的LT1的确会活的较健康. 09/02 14:34