作者kirby0415 ()
看板Biotech
标题[问题] NORTHERN一直做不出来
时间Sat Aug 18 13:07:20 2007
想请问板上有做过NORTHERN的各位
我实验室的NORTHERN不是用kit做的
而是自己配northern所需的buffer
但是最後ECL呈色出来 RNA的地方都反白
但我positive control(是DNA)都一直有做出来
我当初是以为可能再transfer过程 RNA就degrade了
所以去做了dot blot
但结果仍然一样
那我又想说也许是我要测的那个RNA 在细胞里的量太少所以看不到
所以我又另外制备了actin probe
想说actin在细胞里的量很多 看可不可以再跟probe hybridization到
但是结果一样 就是RNA又反白
我们的probe是用biotin-avidin的方式侦测的
所以想请教有经验的各位
我的northern到底是哪里出了问题？
谢谢罗！
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.94.43
1F：推 nixo:反白的话可能是信号太强了，ECL被消耗掉。 08/19 19:03
2F：→ kirby0415:是喔?那我再去查查看 谢谢~ 08/20 12:22