作者leftt (left)
看板Biotech
标题Re: [问题] 关於northern的问题
时间Sat Aug 11 22:48:42 2007
我以前用过molecular cloning的古典法做过
你用哪种gel跑? formamide吗?
跑电泳的时候有加上一点点EtBr吧
一个偷吃步
transfer完偷偷在紫外灯上看一下就知道膜上有没有东西了
不然唷 照一下你transfer後扁扁的gel渣
看看有没有很多残留 也可以知道
Southern也可以用这招测试
如果为谨慎连EtBr都没加的
可以把gel渣在拿去外染EtBr也可以知道
因为这样就可以看出来
所以我从来没有染过膜 後面的问题就无从回答起了
※ 引述《kirby0415 ()》之铭言:
: 因为我们实验室做northern并不是用kit去做
: 而是用自己配的buffer 还有实验方法
: 我现在遇到了一个问题
: 就是我想去看我transfer以及crosslink後
: RNA到底有没有确实crosslink到nylon membrane上
: 在网路上有查了资料
: 好像可以用methylene blue去染membrane
: 这样可以知道membrane上是否有RNA
: 想请问有做过这样染色的人
: 此方式是否真的可行?
: 那....crystal violet可以取代methylene blue吗?
: 因为这两个染剂 其实大多都是在染细胞细菌的吧?
: 用在northern的这个检验步骤 好像蛮少人试过的
: 请知道的版友可以解惑一下罗 谢谢~
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