作者mournermind (阿蒙)
看板Biotech
标题[求救] pET32 vector的使用
时间Tue Aug 7 17:53:28 2007
因为实在没什麽头绪想请有经验的各位提供个想法
我现在要的蛋白接在pET32b中 想要利用它的trx来增加我蛋白的可溶性
表现後的确本来几乎不可溶的蛋白(以前学姐做)变的是有部份可溶了
我现在想利用纯化soluable protein的方式来纯化出我要的蛋白
再将trx切掉得到较完整的我要的蛋白 但是由於以酵素切掉trx後
His後所得到的proein带有His tag而被切掉的trx上也带有His tag
所以想问有经验的学长姊们遇到这问题可以怎麽做呢?
我应该可以如何来将这两个都带有his的蛋白分开来咧@@?
真的是很想知道应该怎麽做 有办法的人请给我一些指点 orz
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1F：推 diskitty:Gel filtration? 08/08 09:00
2F：推 zytase:嗯~我也想到用gel filtration去分,不知道这两个蛋白分子量? 08/08 17:43
3F：推 ATKINS:Q 08/09 01:28