作者belady (白衣天使黑心肝)
看板Biotech
标题[问题] 将mRNA转成cDNA
时间Wed Jul 4 16:05:27 2007
请问版上先进
作进实验室要开始作real time RT-PCR
目前所欲想的仪器是使用Roche 方法是利用SyBr Green进行染色
不过对这方面完全没有经验 加上我是老师的第一位研究生
所以....
目前的构想是
像Roche购买SyBr Green套组加上sample cup
跟合作厂商订制primer(follow先前已发表的paper)
萃细菌RNA-使用向厂商购买套组
但今天询问Roche special list时 他有提到最好事先转成cDNA在进行real time会比较好
但因为cDNA的资料实在是太少
以前教科书上也只说说将RNA以RTase处理便可以得到cDNA
但细节却没提到
RTase也是购买套组吗？
要在额外加入nucleotide吗？
谢谢回答..
我刚去看了一些厂商的protocal
大约知道要使用的东西使哪些
不过protocal上的primer是使用oligo dT
不过原核细胞没有polyA啊～
我该怎麽办？
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.128.151.223
1F：推 LBP:是SYBR green.... (小声) 07/04 16:23
2F：推 LBP:做RT有kit可以买,通常所需要的东西kit里面都有 :) 07/04 16:26
3F：推 mikis1107:可以上网找英文protocol先看看要准备的东西有哪些 07/04 16:37
※ 编辑: belady 来自: 140.128.151.223 (07/04 16:44)
4F：推 belady:谢谢一楼～我改好咧！ 07/04 16:44
※ 编辑: belady 来自: 140.128.151.223 (07/04 16:46)
5F：推 micocat:random hexmer? 07/04 19:08
6F：推 belady:谢谢版大先进们的帮忙～明天一早我会再跟老板讨论最後决定 07/05 01:08