1.你确定你的SAMPLE中所要IP的蛋白够多 2.你确定你用的Ab可以做IP 3.你是用proteinA还是G 确定一抗是来自哪种动物的抗体 所选用的seprrose效率是否够好 4.最後核蛋白做IP是OK的 你若怀疑SALT浓度太高 可以稀释後再IP 另外应该将配方写出 大家才能给你更好的建议 ※ 引述《doskoi (doskoi)》之铭言： : 先说说抽nuclear protein的方法 : 就是用hypotonic buffer先弄破细胞,分离出核 : 再用high salt extraction buffer去抽取核蛋白 : 但取出核蛋白後 : 不论是cytoplasma fraction 或nuclear fraction : 想要的蛋白都没办法用proteinA/G抓下来 : 大部分都还留再上清液里 : ip方法应该ok,因为其他人做不同sample做的出来 : 曾想过是不是salt concentration太高 : 但连cytoplasma fraction都没有做出来 : 想说是不是有什麽其他问题? : 有人用nuclear protein做ip吗? : 可以分享一下经验吗? --

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