※ 引述《[email protected] (喔.....................)》之铭言： > ※ 引述《mona210 (喔屋)》之铭言： > : PCR 所得到的 DNA 片段中一个EcoRI的切割位置，而某噬菌体中有五个EcoRI切割位置， > : 那我应该加入多少体积酵素才能在一小时内把1μg实验用的DNA给完全切割? > : ( EcoRI酵素浓度约为10 U/μl ) > : 我想要知道怎麽算.... > : 因为自从上次那个"初学者问题" > : 有时对自己会有点没信心 ^^" > : 希望板上的老手or高手能帮帮忙 > : 谢谢^^~ > 你的酵素是跟NEB买的吗? > 根据NEB的酵素unit的定义是 > 1 U = digest 1ug DNA in an hour > 所以基本上如果你想在一小时内将你的实验DNA完全切割 > 取 1 U 应该够(换句话说就是 0.1 uL) 不完全如此 unit的定义 每种酵素及厂牌不同 主要看这酵素切的DNA上面有多少切位以及该DNA的大小 你可以去翻目录 1 u = complete digestion of 1 microgram Lambda phage DNA ( 40 kb, 6 cutting sites) 1 u = complete digestion of 1 microgram pUC18 phage DNA (2.7 kb, 2 cutting sites) 这两者差距甚大 -- ※ Origin: 生命科学 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw> ◆ From: 61-59-139-151.adsl.static.seed.net.tw