作者freshing (hold on ~~)
看板Biotech
标题Re: [问题] 关於His tag
时间Sun Apr 8 08:20:31 2007
※ 引述《countonme (that's just me)》之铭言：
: His tag通常都是在fusion protein的N端或C端
: 如果我将His tag在N端的fusion protein前面再加入28个氨基酸
: 也是就是说我的His tag不在N端的头，而是从N端的第29个氨基酸开始
: 那麽纯化时过Ni column还会被抓到吗？
: 感谢所有曾有类似经验的先知分享你的经验 ^^
如果你是在 denature 的状态下纯化,我猜应该影响不大
要是在 native 的状况下纯化的话,那就不一定了
要看整体的蛋白构型,来决定His-tag暴露的情况而定
如果His-tag比较暴露在表面,那就应该没差,不然你就flow through多过几次
or binding 久一点搂
你前面多加的28个AA有人有做过吗?
你要不要先去参考看看再决定 :)
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 218.175.157.216