> : 你的insert太大了 理论上本来就不可能接的起来 > : 一般来说 只要超过vector大小1/3的insert都太大 但也许有高手觉得没差(汗) > : 在ligation过程中insert跟vector很难去碰撞到并且起反应 > 其实vector/insert都是DNA 当insert比vector大时把它成vector角色就好啦 > 而且DNA浓度也是关键要素之ㄧ,至少我切完回收後都有1ug 原则上insert小於 > 4K都蛮好接的 但若大於4K时 就真的需要一些技巧的 因为之前实验室有再做BAC > clone所以 接9K 5K是很稀松平常的事..... > > -- >

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) > ◆ From: 140.109.227.169 f大大 可否请教一下您家都用什麽方式纯化吗 因为我们家 都乱用 大家都觉得纯化效率很差 目前我取60ul(3000ng/ul)的dna去切 (我强烈怀疑这个质是假的) 但最後胶纯化後体积100ul 浓度我估计只有5ug/ul 也就是我切了如此大量的dna却只回收到500ng左右 所以想请教一下f大 用了多少dna去切 用什麽方式纯化 -- 如果美丽必须成为过去 别忘了临走时 请将记忆装入行囊 顺便关上曾经为你而开的窗 -- ╭─ Origin ─╗ 新绿园 bbs.sa.ncyu.edu.tw ～ κλμ ─┤ ├ Author ╡ 098063.CAGR.ncyu.edu.tw