※ 引述《gilchang (到头来只是个墙外行人)》之铭言： > ※ 引述《[email protected] (一只小蚂蚁)》之铭言： > > 请教一下: > > 老板丢了一个sample给我,是从国外要来的plasmid,好像是直接点在3M membrane上, > > 我的想法是直接把3M membrane放入tube内,加入65度C加温的水或TE buffer,incubation > > 数小时後,取出跟competent cell mix利用heat shock的方式送入E. coli保存, > > 再利用抗生素筛选抽Plasmid,可是上次的经验是失败了,因为Plate根本没有菌落长出来, > > 证明我elute DNA失败,想请问各位前辈有没从这种paper上elute DNA之经验,可以传授一下 > > 吗? 1. 基本上只要剪一小片有点到的membrane就够了 2. 用TE Buffer或二次水再eppendorff慢慢溶就好就好(应该不需要用65度c的) Transformation後 先不要丢就放着继续溶 等菌长出来抽到plasmid再说 3. 请确认抗生素是否用对! -- 夫兵者不祥之器物或恶之故有道者不处君子居则贵左用兵则贵右兵者不祥之器非君子 之器不得已而用之恬淡为上胜而不美而美之者是乐杀人夫乐杀人者则不可得志於天下 矣吉事尚左凶事尚右偏将军居左上将军居右言以丧礼处之杀人之众以哀悲泣之战胜以 丧礼处之道常无名朴虽小天下莫能臣侯王若能守之万物将自宾天地相合以降甘露民莫 之令而自均始制有名名亦既有夫亦将知止知止可以不殆譬道之在天下 192.192.9.1海