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标 题Re: [问题] 如何将蛋白质结合在一起
发信站不良牛牧场 (Sun May 22 15:39:28 2005)
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※ 引述《[email protected] (perk yourself up)》之铭言:
: 因为想研究一个蛋白质的某个domain 的 modification
: 如何影响到另一个domain 的活性
: 却又不想使两个domain 同时被 modify (两个domain 都有modify 的位置)
: 而使用一般的chemical cross linker 会 nonspecific modification
: 其结合方式会不正确 结合方式与 native 的方式会不同
: 请问板上诸大
: 有没有看过任何方法
: 可以将两个不同的蛋白质接在一起
: 而非是经由 cloning 的方式
: 且接在一起的方式分别为两个蛋白质的N端跟C端的结合
将domain A与fish的gene做fusion
将domain B与bait的gene做fusion
然後将domain A-fish的部分先做modofication
再将domain A-fish-M混在domain B-biat混和
观察有M和没M的结果是否有差异......
只是这样透过一个中间物不知是否会对您的实验需求有影响就是
看起来像yeast two hybrid XDDDDD
不然就...利用chemical reagent做partial modification吧
控制chemical的浓度、反应pH、buffer,etc...
印象中Cyanylation测disulfide bond的方式也是partial modification ^^"
(最近千面人很热阿...XDDDD)
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以上纯为打嘴炮,小弟我也没做过 :DDD
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