作者haaaaaa (work hard work smart)
看板sinica
標題[問題] 關於human type I collagen的萃取和測定
時間Tue Dec 24 18:07:14 2013
各位對collagen有研究的前輩們好，最近我想從fibroblast cell culture中，將ECM裡的collagen萃取出來。我的做法如下（因為手機發文，排版問題先說聲抱歉了…）
1.用500 ul 0.05M acetic acid將6cm plate上細胞刮下。
2. 加入50 ul pepsin，反應至隔天。
3. 加入50 ul 10x TBS 。
4. 加入 50ul Elastase, 反應至隔天。
5. 最後10000 rpm, 5mins。取上清液以MD bioproducts的kit測試。
結果acetic acid顯示有matrix effect....
請問有前輩用這個kit成功測得type I collagen嗎？還是我整個過程出了什麼問題呢？希望好心人能給我一些建議～感激不盡呀～
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