作者haaaaaa (work hard work smart)
看板sinica
标题[问题] 关於human type I collagen的萃取和测定
时间Tue Dec 24 18:07:14 2013
各位对collagen有研究的前辈们好，最近我想从fibroblast cell culture中，将ECM里的collagen萃取出来。我的做法如下（因为手机发文，排版问题先说声抱歉了…）
1.用500 ul 0.05M acetic acid将6cm plate上细胞刮下。
2. 加入50 ul pepsin，反应至隔天。
3. 加入50 ul 10x TBS 。
4. 加入 50ul Elastase, 反应至隔天。
5. 最後10000 rpm, 5mins。取上清液以MD bioproducts的kit测试。
结果acetic acid显示有matrix effect....
请问有前辈用这个kit成功测得type I collagen吗？还是我整个过程出了什麽问题呢？希望好心人能给我一些建议～感激不尽呀～
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