革蘭氏染色法(Gram stain) 鑑別染色需用經熱固定之抹片，且連續使用三種化學藥劑。最初試劑是所謂初染劑，其目 的使細菌著色。為形成顏色對比，第二試劑為脫色劑。依細胞化學組成之不同，脫色劑可 完全除去初染或僅除去部份細胞構造之顏色。最後試劑是謂複染劑，與初染呈對比顏色。 脫色時若初染未洗去，則複染不能吸收，細胞與其組成將保留初染顏色。若初染脫色，則 細胞組成即吸收複染之對比顏色。因此細胞之形成或其構造，可依保留之染色劑而鑑別之 。用於細菌學上最重要之鑑別染色法是謂革蘭氏染色。此法乃微生物分類與鑑別之主要工 具，可將細菌區分為兩大組，即革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌。本法使用四種不同試劑， 茲將其作用機轉分別簡述如下： 初染劑：初染劑乃結晶紫，使細菌染成紫藍色。 媒染劑：乃革蘭氏碘液，可與初染劑結合而形成不溶性複合物。所形成之 結晶紫-碘（CV-I）複合體藉以加強染料顏色，此時所有細菌均成紫黑 色。 脫色劑（Decoloring agent）：乃95%乙醇，此試劑具有脂溶性 （lipid solvent）與蛋白質脫水劑之雙重功能。其作用依微生物細胞壁 所含脂肪濃度而定。格蘭氏陽性菌之脂質含量低且細胞壁具有厚層之汰 聚醣，乃保留CV-I複合體之主要因素，因少量之脂質經乙醇作用，立刻 溶解，形成細胞壁之細孔，但此細孔隨即因乙醇之脫水作用而封閉，以致 緊密結合之初染劑不易移去，終於保留紫色。革蘭氏陰性菌細胞壁中之外 層含高量之脂質，易為乙醇溶解，形成大孔。即使引起細胞壁蛋白之脫水 也不易封閉該孔，因此有利於未結合CV-I複合體之釋出，致使菌體成無色。 複染劑：最後試劑為番紅，凡經上述脫色之細菌，被此染料染成紅色。因僅革蘭 氏陰性菌發生脫色，故於此步驟能吸收複染劑。革蘭氏陽性菌則保留初 染時之紫色。 上面已經有答案... 再提供一個... 用革蘭氏染色法染色細菌細胞壁，並用酒精脫色。若能將紫色脫去而呈紅色者稱革蘭氏陰 性菌；若呈紫色，則為革蘭氏陽性菌。此法可將所有的細菌分為這兩類，這與細胞壁成分 有關。 革蘭氏陽性菌的壁厚達15-35nm，組成成分中的胞壁酸、磷壁酸和二氨基庚二酸則為陽性 菌特有。革蘭氏陰性菌的壁較薄（10-15nm），成份比陽性菌複雜。不含磷壁酸，但含有 脂蛋白、脂多糖和球蛋白等。 -- 嗯嗯 請斟酌服用 --

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