革兰氏染色法(Gram stain) 监别染色需用经热固定之抹片，且连续使用三种化学药剂。最初试剂是所谓初染剂，其目 的使细菌着色。为形成颜色对比，第二试剂为脱色剂。依细胞化学组成之不同，脱色剂可 完全除去初染或仅除去部份细胞构造之颜色。最後试剂是谓复染剂，与初染呈对比颜色。 脱色时若初染未洗去，则复染不能吸收，细胞与其组成将保留初染颜色。若初染脱色，则 细胞组成即吸收复染之对比颜色。因此细胞之形成或其构造，可依保留之染色剂而监别之 。用於细菌学上最重要之监别染色法是谓革兰氏染色。此法乃微生物分类与监别之主要工 具，可将细菌区分为两大组，即革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌。本法使用四种不同试剂， 兹将其作用机转分别简述如下： 初染剂：初染剂乃结晶紫，使细菌染成紫蓝色。 媒染剂：乃革兰氏碘液，可与初染剂结合而形成不溶性复合物。所形成之 结晶紫-碘（CV-I）复合体藉以加强染料颜色，此时所有细菌均成紫黑 色。 脱色剂（Decoloring agent）：乃95%乙醇，此试剂具有脂溶性 （lipid solvent）与蛋白质脱水剂之双重功能。其作用依微生物细胞壁 所含脂肪浓度而定。格兰氏阳性菌之脂质含量低且细胞壁具有厚层之汰 聚醣，乃保留CV-I复合体之主要因素，因少量之脂质经乙醇作用，立刻 溶解，形成细胞壁之细孔，但此细孔随即因乙醇之脱水作用而封闭，以致 紧密结合之初染剂不易移去，终於保留紫色。革兰氏阴性菌细胞壁中之外 层含高量之脂质，易为乙醇溶解，形成大孔。即使引起细胞壁蛋白之脱水 也不易封闭该孔，因此有利於未结合CV-I复合体之释出，致使菌体成无色。 复染剂：最後试剂为番红，凡经上述脱色之细菌，被此染料染成红色。因仅革兰 氏阴性菌发生脱色，故於此步骤能吸收复染剂。革兰氏阳性菌则保留初 染时之紫色。 上面已经有答案... 再提供一个... 用革兰氏染色法染色细菌细胞壁，并用酒精脱色。若能将紫色脱去而呈红色者称革兰氏阴 性菌；若呈紫色，则为革兰氏阳性菌。此法可将所有的细菌分为这两类，这与细胞壁成分 有关。 革兰氏阳性菌的壁厚达15-35nm，组成成分中的胞壁酸、磷壁酸和二氨基庚二酸则为阳性 菌特有。革兰氏阴性菌的壁较薄（10-15nm），成份比阳性菌复杂。不含磷壁酸，但含有 脂蛋白、脂多糖和球蛋白等。 -- 嗯嗯 请斟酌服用 --

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