※ [本文轉錄自 NTUmed91work 看板] 作者: ponyo (反省吧) 看板: NTUmed91work 標題: Re: [問題] 遺傳實驗的問題... 時間: Sun Jan 5 19:00:42 2003 ※ 引述《sammil (建造雨林)》之銘言： : ※ 引述《chanyang (數羊..數小太陽:*)》之銘言： : : Solution 1: 把細菌打散 : : Tris-Cl:緩衝液 : : EDTA:抓住2+ cation(2+ cation is a coenzyme) : : Solution 2:lyse the germs : : 0.2N NaOH: 將所有物質溶解 : : SDS:break cell membrane : : Solution 3: : : 5M potassium acetate:沉澱SDS 把 ***(?) (字太亂看不懂ㄌ) 請補充!! : ***(?)應該是使protein和lipid形成穩定的錯合物 我們班的助教是說，鉀離子會取代SDS中的鈉離子 使SDS（不知被取代後還叫不叫SDS）容易沈澱 : : 冰醋酸:中和溶液 使大部分沉澱 except plasmid (中和NaOH) 加了solution2後細菌被打了許多洞，我們要的plasmid就會流出 但是較大的genomic DNA應該還留在菌體內 加入solution3把NaOH中和，把SDS除掉 還有接下來的離心除去菌體殘渣（本來還有一步加phenol,chloroform以除去蛋白和脂質） 這樣應該就很乾淨了...除了plasmid應該只有一些RNA而已 -- 挖戰壕捉蚯蚓奮勉向上更加向上 聽槍聲如溪流勤種地瓜也吃地瓜 --

※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.csie.ntu.edu.tw) ◆ From: 218.184.29.151 -- 搖一柄桂槳，邀你溫情河裡泛舟 你可願意？ 河是深了點，但那是思念溪彙成的河流 真愛沉不了 何況還有我深情的雙眸相擁你左右 你還在忐忑？ --

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